碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)重組蛋白大鼠

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Deiodinase, Iodothyronine, Type III (DIO3)

ITDI3; TXDI3; Type-III 5'-deiodinase

型號：GOY-01D844

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞膜

預測分子量：45.1kDa

實際分子量：45kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Arg37~Thr169 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.3

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Beta Secretase 2 (BACE2)

產(chǎn)品名稱：組織A(CTSA)重組蛋白  物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)  英文名稱：Recombinant Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱：組織A(CTSA)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱：組織A(CTSA)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱：激6(KLK6)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Kallikrein 6 (KLK6)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 Neuropilin 1

核因子2相關(guān)因子2抗體 Nrf2

神經(jīng)生長因子4/5抗體 Neurotrophin 4

巢蛋白NID2抗體 Nidogen 2

線粒體鈉/氫交換蛋白質(zhì)2抗體 NHEDC2

神經(jīng)元素1抗體 Neurogenin 1

神經(jīng)肽Y抗體 Neuropeptide Y

神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 Neurturin

神經(jīng)纖毛蛋白2抗體 Neuropilin 2

受體2D抗體 NR2D

受體2B抗體 NMDAR2B

原癌基因N-Ras抗體 NRAS

碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)重組蛋白大鼠HE染色試劑盒3×10ml盒

DCIP 2，6-二酚靛酚鈉1g瓶

Dexamethasone sodium phosphate 磷酸鈉5g瓶

p-Coumaric acid 對豆酸501-98-420mg

Laccase 漆酶1g瓶

Kanamycin ( 100mg/ml)卡那10ml瓶

CollagenaseⅡ 膠原酶Ⅱ100mg支

Ferric Cltrate 檸檬酸鐵100g瓶

Pterostilbene 紫檀芪537-42-820mg

普魯士藍染色試劑盒(Perls stain，中性紅法)2×50ml瓶

Tris飽和酚250ml瓶

載玻片雙面磨砂50片盒