詳細(xì)介紹
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:半乳糖神經(jīng)酰胺酶(GALC)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Galactosylceramidase (GALC)
產(chǎn)品名稱:TTK蛋白激酶(TTK)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant TTK Protein Kinase (TTK)
產(chǎn)品名稱:N-甲基嘌呤DNA糖基化酶(MPG)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant N-Methylpurine DNA Glycosylase (MPG)
產(chǎn)品名稱:N-甲基嘌呤DNA糖基化酶(MPG)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant N-Methylpurine DNA Glycosylase (MPG)
產(chǎn)品名稱:艾杜糖-2-酯酶(IDS)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Iduronate-2-Sulfatase (IDS)
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D854 |
英文名稱:Recombinant Phosphoglycerate Kinase 1 (PGK1)
MIG10; PGKA; PRP 2; Cell migration-inducing gene 10 protein; Primer recognition protein 2
型號(hào):GOY-01D854
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:48.2kDa
實(shí)際分子量:48kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Ser2~Ile417 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):8.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 Nm23
神經(jīng)激肽B受體抗體 Neurokin B receptor
腫瘤抑制基因抗體 NME1
腫瘤抑制基因抗體 Nm23-H2
孤菲肽/痛敏肽抗體 Nociceptin
軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子受體/Nogo受體抗體 Nogo R
神經(jīng)元引導(dǎo)蛋白3抗體 NAV3
細(xì)胞毒性受體NK-p46抗體 NCR1
NYS48蛋白抗體 NYS48
肌痙攣性癲癇病相關(guān)EPM2蛋白抗體 NHLRC1
神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白2抗體 Neurabin 2
非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白2抗體 NHLRC2
磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)重組蛋白人EDTA Free acid 乙二胺四乙酸100g瓶
ConA Type A IV 刀豆蛋白A IV25mg瓶
L-Malic acid L-蘋果酸97-67-6100mg
2×Taqman PCR MasterMix50T支
Vitamin B5 維生素B5137-08-620mg
RNAsaver(RNA長(zhǎng)效保存液)1.5ml支
兔IgG-ECL顯色試劑盒1kit盒
結(jié)晶紫染色液(2.5%)10ml瓶
GC-(-)-gallocatechin 沒(méi)食子兒茶素3371-27-520mg
PhosphoMycin disodiuM salt 磷鈉1g瓶
人IgG干粉1g支
2-Naphth 2 acetate 乙酸-2-萘酯5g瓶
Avidin-FITC0.5ml支