詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
泛醌蛋白2(UBQLN2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D888 |
英文名稱:Recombinant Ubiquilin 2 (UBQLN2)
CHAP1; CHAP1/DSK2; Dsk2; LIC-2; N4BP4; PLIC-2; PLIC2; NEDD4 Binding Protein 4; Protein linking IAP with cytoskeleton 2; Ubiquitin-like product Chap1/Dsk2
型號(hào):GOY-01D888
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:14.0kDa
實(shí)際分子量:14kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ile33~Ala126 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):9.4
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (ASK1)
產(chǎn)品名稱:血小板激活因子乙酰水解酶Ⅰb3(PAFAH1B3)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Platelet Activating Factor Acetylhydrolase Ib3 (PAFAH1B3)
產(chǎn)品名稱:蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK1)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Protein Interacting With C Kinase 1 (PICK1)
產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz)
產(chǎn)品名稱:拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(2b)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant oisomerase II Beta (2b)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白3抗體 NFAT4
9號(hào)染色體開放閱讀框156抗體 C9orf156
干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體 NANOGP8
神經(jīng)細(xì)胞凋亡抑制蛋白抗體 NAIP
腎病樣蛋白2抗體 NLG1
SNF1/AMP激酶相關(guān)激酶2抗體 NUAK2
雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒)抗體 Newcastle disease virus
神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白1抗體 NXPH1
神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)化酶2抗體 Proprotein Convertase 2
神經(jīng)肽W抗體 NPW/Neuropeptide W
神經(jīng)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 NENF
神經(jīng)肽Y受體5抗體 NPY5R
泛醌蛋白2(UBQLN2)重組蛋白人蛋白胨水(靛基質(zhì)培養(yǎng)基) 規(guī)格: 100g 用途: 供鑒別細(xì)菌能否產(chǎn)生靛基質(zhì)的生化反應(yīng)
半糖凝集素9B(GAL9B)重組蛋白英文名稱:Recombinant Galectin 9B (GAL9B)
核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ribosomal Protein L23A (RPL23A)
橋粒芯糖蛋白1(DSG1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Desmoglein 1 (DSG1)
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)
蛋白Z(PROZ)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Z (PROZ)
小鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱:Pcc4
酸菌液體培養(yǎng)基/Lactobacillus Fluid Medium250克國產(chǎn)/進(jìn)口
酵母浸出粉胨葡萄糖肉湯/YPD肉湯/YEPD肉湯/Yeast Extract Peptone Dextrose BrothBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口
T1N3肉湯/T1N3 Broth霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
放線菌/Actinomycete Broth Medium250克國產(chǎn)/進(jìn)口
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞英文名稱:BHK