神經(jīng)疾病靶標(biāo)酯酶(NTE)重組蛋白大鼠

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Neuropathy Target Esterase (NTE)

PNPLA6; Sws; Patatin-Like Phospholipase Domain Containing 6

型號：GOY-01D912

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜

預(yù)測分子量：22.5kDa

實際分子量：23kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu965~Thr1137 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：8.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：白三烯A4水解酶(LTA4H)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H)

產(chǎn)品名稱：氧化酶亞基Ⅲ(COX3)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Cytochrome C Oxidase Subunit III (COX3)

產(chǎn)品名稱：氧化酶亞基Ⅳ亞型1(COX4I1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Cytochrome C Oxidase Subunit IV Isoform 1 (COX4I1)

產(chǎn)品名稱：泛醇還原酶(UQCR)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Ubiquinol Cytochrome C Reductase (UQCR)

產(chǎn)品名稱：體亞基α1(PSMa1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 1 (PSMa1)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-3抗體 OAT-3

陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體 SLC22A6

催產(chǎn)素受體受體)抗體 Oxytocin R

緊密連接蛋白抗體 OCLN

卵巢癌免疫反應(yīng)抗原抗體 OCIAD1

大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體 OMPC

神經(jīng)叢蛋白B1抗體 Plexin B1

磷酸化蛋白激酶C(T410)抗體 phospho-PRKCZ(Thr410)

磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 phospho-PRKD1(Tyr463)

細(xì)胞表面受體PILRβ抗體 PILR beta

磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 phospho-PRKD1(Ser738)

前列腺癌相關(guān)蛋白4抗體 PAGE4

神經(jīng)疾病靶標(biāo)酯酶(NTE)重組蛋白大鼠O-Dianisidine dihydrochloride 鄰聯(lián)茴香胺1g瓶

Rhein 大黃酸478-43-320mg

Fuchsin basic 堿性品紅5g瓶

丙烯酰胺溶液（49.5%T，3%C）500ml瓶

20ml注射器 國產(chǎn)1支袋

兔抗雞IgG-HRP0.1ml支

PVDF膜(0.45um)30cm×3m卷

Bromphenol Blue 溴酚藍(lán)5g瓶

Curculigoside 仙茅苷85643-19-220mg

Acetylcholinesterase 乙酰酯酶50mg瓶

Tyramine 對羥基乙胺-酪胺51-67-220mg

Taq DNA 聚合酶500u支

豚鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200ml/KIT盒