詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
NAD激酶(NADK)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D918 |
英文名稱:Recombinant NAD Kinase (NADK)
Poly(P)/ATP NAD kinase
型號:GOY-01D918
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:55.8kDa
實(shí)際分子量:56kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Leu187~His426 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:肽基脫亞氨酶Ⅱ(PADI2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Peptidyl Arginine Deiminase Type II (PADI2)
產(chǎn)品名稱:DNA指導(dǎo)聚合酶γ1(POLg1)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Gamma 1 (POLg1)
產(chǎn)品名稱:過氧化還原酶6(PRDX6)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 6 (PRDX6)
產(chǎn)品名稱:跨膜6(TMPRSS6)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Transmembrane Protease, Serine 6 (TMPRSS6)
產(chǎn)品名稱:S-期激酶關(guān)聯(lián)蛋白1(SKP1)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant S-Phase Kinase Associated Protein 1 (SKP1)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
配對盒基因3抗體 PAX3
多腺苷二磷酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1 PARP1
配對盒基因8抗體 PAX8
配對盒基因9抗體 PAX9
P-鈣粘附分子抗體 P-cadherin
腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體 PACAP-38
腫瘤抑制基因P53蛋白抗體(野生型P53) P53 protein(wt-p53)
腫瘤抑制基因p63α抗體 P51A
血小板源性生長因子AB+BB抗體 PDGF AB+BB
增殖細(xì)胞核抗原抗體 PCNA [Proliferation Marker]
磷酸二酯酶4A8抗體 PDE4A8
腦特異性多肽蛋白19抗體 PCP4
NAD激酶(NADK)重組蛋白人人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:HT-29
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞英文名稱:K562
再生蛋白1(NEO1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neogenin 1 (NEO1)
Tolloid樣蛋白1(TLL1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tolloid Like Protein 1 (TLL1)
DiI-HDL DiI標(biāo)記高密度脂蛋白500ug瓶
l-Perillaldehyde 紫蘇醛18031-40-820mg
BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞10×100ul袋
大鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
氯化三苯四氮唑沙保羅培養(yǎng)基/紅四氮唑沙保羅培養(yǎng)基/三苯基氯化四氮唑沙保羅培養(yǎng)基/TTC-Sabourand,s Medium用于分離真菌,酵母菌等250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SYBR Green I(10000×)100ul瓶
20(R)Ginsenoside Rg3 20(R)38243-03-720mg
蓋玻片 18×18mm100片盒