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二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-10 10:33:55瀏覽次數(shù):107

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D948 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) Recombinant Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:膜粘連蛋白9抗體 英文名稱(chēng):Annexin A9 0.2ml整合素樣金屬與15型抗體 英文名稱(chēng):ADAMTS15 0.2ml整合素樣金屬與8型抗體 英文名稱(chēng):ADAMTS8 0.2ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

物種

貨號(hào)

二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D948

 

 

英文名稱(chēng):Recombinant Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH)

DHOdehase; Dihydroorotate oxidase; Dihydroorotate dehydrogenase (quinone), mitochondrial

型號(hào):GOY-01D948

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:42.4kDa

實(shí)際分子量:42kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Arg35~Asp392 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):9.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱(chēng):琥珀酸脫氫酶復(fù)合體C亞基(SDHC)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱(chēng):Recombinant Succinate Dehydrogenase Complex Subunit C (SDHC)

產(chǎn)品名稱(chēng):琥珀酸脫氫酶復(fù)合體D亞基(SDHD)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱(chēng):Recombinant Succinate Dehydrogenase Complex Subunit D (SDHD)

產(chǎn)品名稱(chēng):泛素蛋白連接酶E3成分N-識(shí)別蛋白4(UBR4)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱(chēng):Recombinant Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 4 (UBR4)

產(chǎn)品名稱(chēng):含WW域E3泛素蛋白連接酶2(WWP2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱(chēng):Recombinant WW Domain Containing E3 Ubiquitin Protein Ligase 2 (WWP2)

產(chǎn)品名稱(chēng):AXL受體激酶(AXL)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱(chēng):Recombinant AXL Receptor Tyrosine Kinase (AXL)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

凋亡相關(guān)蛋白10抗體 PDCD10

豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病病毒抗體 PRRSV

鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶磷酸酶抗體 PPM1F

/蛋白激酶PIM3抗體 PIM3

組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體 PRMT5

原鈣粘附蛋白11X抗體 PCDH11X

原鈣粘附蛋白11Y抗體 PCDH11Y

原鈣粘附蛋白12/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白2抗體 PCDH12

原鈣粘附蛋白1抗體 PCDH1

原鈣粘附蛋白α1抗體 PCDHA1

原鈣粘附蛋白17抗體 PCDH17

原鈣粘附蛋白α3抗體 PCDHA3

二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)重組蛋白人胎兒表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

Sabourand's Agar Medium 沙氏培養(yǎng)基250g瓶

Sulfapyridine 磺胺吡144-83-2100mg

PEG 8000 聚乙二醇 80005kg瓶

4'-Demethylepipodophyllotoxin 4'-去甲氧基表786593-06-420mg

MES 2-(N-啡啉)乙磺酸10g瓶

Neohesperidin 新13241-33-320mg

無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員2(WNT2)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2)

兔抗大鼠IgG(免疫血清)0.5ml支

50ml親和層析柱 (2.5×16)50ml個(gè)

藍(lán)色預(yù)染低分子量蛋白質(zhì)Marker20T支

Cefazolin sodium salt 鈉5g瓶

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