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兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白大鼠

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更新時(shí)間:2023-03-10 10:49:58瀏覽次數(shù):165

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D957 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)
物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)    
兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白大鼠公司正在出售的產(chǎn)品:載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物2抗體 英文名稱:APOBEC2 0.2ml載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3B抗體 英文名稱:APOBEC3B 0.2ml載脂蛋白C1抗體 英文名稱:Apolipoprotein CI/APOC1 0.2ml

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)

產(chǎn)品名稱:激1(KLK1)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Kallikrein 1 (KLK1)

產(chǎn)品名稱:(AP)重組蛋白  物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)  英文名稱:Recombinant Aprotinin (AP)

產(chǎn)品名稱:(AP)重組蛋白  物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)  英文名稱:Recombinant Aprotinin (AP)

產(chǎn)品名稱:半連接酶(GCLM)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

GOY-01D957

 

 

英文名稱:Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)

酶與激酶

型號(hào):GOY-01D957

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測分子量:23.8kDa

實(shí)際分子量:24kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly63~Ser264 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):5.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

蛋白激酶C mu型抗體 PKC mu

磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 phospho-PKC delta (Ser645)

纖溶酶原激活物抑制因子抗體 PAI-1

胃原C抗體 Pepsinogen II

磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 phospho-PRKD1(Ser742)

1抗體 Profilin 1

增殖細(xì)胞核抗原抗體 PCNA-Proliferation Marker

磷酸化粘著斑激酶抗體 phospho-FAK(Tyr925)

磷酸化p21激活激酶1抗體 phospho-PAK1(Thr212)

磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 Phospho-PDPK1(Tyr9)

磷酸化粘著斑激酶抗體 phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577)

磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 Phospho-PDPK1(Ser396)

兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白大鼠羊抗雞IgG-RBITC0.5ml支

Scutellarein 野黃芩素529-53-320mg

Cy55 mg支

3'-Hydroxy Puerarin 3'-羥基117076-54-520mg

Hygromycin B 潮B1g瓶

Byakangelicol 白當(dāng)歸腦26091-79-220mg

磁力攪拌子10mm只

細(xì)胞過濾篩(不銹鋼)60目個(gè)

Methyl jasmonate茉莉酸甲酯5ml瓶

PMA 佛波酯5mg瓶

DL-Malic acid DL-蘋6915-15-720mg

BactoTM TC Lactalbumin Hydrolysate 水解乳蛋白500g瓶

Meropenem trihydrate 三水119478-56-7100mg

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