詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
幾丁質(zhì)酶1(CHIT1)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D958 |
英文名稱:Recombinant Chitinase 1 (CHIT1)
CHI3; Chitotriosidase
型號:GOY-01D958
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:31.5kDa
實際分子量:32kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met210~Ser464 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:半連接酶(GCLM)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM)
產(chǎn)品名稱:類胰(TPS)重組蛋白 物種:Equus caballus; Equine (Horse,馬) 英文名稱:Recombinant Tryptase (TPS)
產(chǎn)品名稱:肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)
產(chǎn)品名稱:(LZM)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Lysozyme (LZM)
產(chǎn)品名稱:絲裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 14 (MAPK14)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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磷酸化磷酯酶Cγ2抗體 Phospho-PLC gamma 2(Tyr753)
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磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 Phospho-Paxillin(Ser83)
磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 Phospho-Paxillin(Ser178)
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磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體 Phospho-p63 (Ser395)
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錫箔紙15m×45cm盒
Magnoflorine chloride 木蘭花堿8827320mg
Bromothymol Blue 溴百里酚藍100g瓶
Coniferyl ferulate 阿魏酸松柏酯63644-62-210mg
Cellulase 纖維素酶1g瓶
Coomassie brilliant blue R-250 考馬斯亮藍R-2505g瓶
Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin 羥丙基-β-環(huán)糊精25g瓶
結(jié)晶紫染色液(1%)100ml瓶
Blue Sepharose 6FF 藍色-糖凝膠 6FF25mL瓶
Ethyl Violet 乙基紫5g瓶
Deoxycholic acid 去氧83-44-320mg