詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
卵巢腫瘤蛋白1(OTUB1)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D987 |
英文名稱:Recombinant Otubain 1 (OTUB1)
HSPC263; OTB1; OTU1; OTU Domain,Ubiquitin Aldehyde Binding 1; Deubiquitinating enzyme OTUB1; Ubiquitin-specific-processing protease OTUB1
型號:GOY-01D987
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:32.5kDa
實際分子量:37kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Lys271 (Accession # B2RYG6) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:ATP酶體26S亞基3(PSMC3)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 3 (PSMC3)
產(chǎn)品名稱:ATP酶體26S亞基2(PSMC2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 2 (PSMC2)
產(chǎn)品名稱:ATP酶體26S亞基4(PSMC4)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 4 (PSMC4)
產(chǎn)品名稱:血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶12(ADAMTS12)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 12 (ADAMTS12)
產(chǎn)品名稱:解整合素金屬10(ADAM10)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
吡哆醛激酶抗體 PDXK
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體 PDZD6
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK1蛋白抗體 PDZK1
前列腺癌激活蛋白抗體 PDZK3
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK4蛋白抗體 PDZK4
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK7蛋白抗體 PDZD7
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白抗體 PDZD8
磷酸化蛋白激酶9抗體 phospho-PTK9 (Tyr321)
過氧化還原酶1抗體 PRDX1
苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 PNMT
過氧化還原酶5/6抗體 PRDX5+PRDX6
前列腺素F2a/PGF2 α抗體 PGF2 alpha
卵巢腫瘤蛋白1(OTUB1)重組蛋白大鼠大鼠肺大靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL
抗生素Ⅴ號培養(yǎng)基/抗生素5號培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.5抗生素微生物的效價測定250克國產(chǎn)/進口
肺英文名稱:Lewis瘤
整合素α3(ITGα3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Integrin Alpha 3 (ITGa3)
X-射線修復(fù)交叉互補蛋白6(XRCC6)重組蛋白英文名稱:Recombinant X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6)
大鼠卵巢成纖維細胞培養(yǎng)基100mL
大鼠腎足突細胞培養(yǎng)基100mL
周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)
白介素12B(IL12B)重組蛋白英文名稱:Recombinant Interleukin 12B (IL12B)
大鼠血管外膜成纖維細胞培養(yǎng)基100mL
鏈球菌培養(yǎng)基1萬毫升/袋國產(chǎn)/進口
人子宮內(nèi)膜細胞英文名稱:Ishikawa
乙酰羧化酶α(ACACα)重組蛋白英文名稱:Recombinant Acetyl Coenzyme A Carboxylase Alpha (ACACa)