詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(PALB)重組蛋白雞 | Chicken (Gallus,雞) | GOY-01D999 |
英文名稱:Recombinant Prealbumin (PALB)
TBPA; PA; PLB; ATTR; TTR; Transthyretin; Prealbumin Amyloidosis Type I; Transports Thyroxine and Retinol
型號:GOY-01D999
酶與激酶
腫瘤免疫
感染免疫
激素代謝
物種:Chicken (Gallus,雞)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:15.7kDa
實際分子量:16kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Ala21~Glu150 (Accession # P27731) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:細胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2)
產(chǎn)品名稱:細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1(ERK1)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase 1 (ERK1)
產(chǎn)品名稱:DNA指導(dǎo)聚合酶β(POLb)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Beta (POLb)
產(chǎn)品名稱:溶血?;D(zhuǎn)移酶4(LPCAT4)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 4 (LPCAT4)
產(chǎn)品名稱:酰胺酶(BTD)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Biotinidase (BTD)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
乳腺癌抑制基因Protor1抗體 Protor-1
過氧化酶活化增生受體γ2抗體 PPAR gamma 2
端粒保護蛋白1抗體 POT1
前列腺癌相關(guān)蛋白2抗體 PCANAP2
天甲基轉(zhuǎn)移酶PCMT抗體 PCMT1
腦胰3抗體 PRSS3
蛋白激酶9抗體 PTK9
胎盤特異基因8蛋白抗體 PLAC8
前動力蛋白2抗體 PROK2
前列腺癌和乳腺癌高表達蛋白抗體 PBOV1
輔肌動蛋白相關(guān)LIM蛋白抗體 PDLIM3
腫瘤抑制基因PHLPP抗體 PHLP
轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(PALB)重組蛋白雞粘蛋白1(MUC1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mucin 1 (MUC1)
Toll樣受體9(TLR9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Toll Like Receptor 9 (TLR9)
圓蓋玻片 直徑10mm100片盒
(+)-Catechin hydrate (+)-兒茶素225937-10-020mg
D-Sorbitol D-50-70-420mg
MRS Agar MRS250g瓶
鈉肉湯基礎(chǔ)/SCPB基礎(chǔ)/SCPB Base/Sodium Chloride Polymyxin Broth Base副溶血弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
骨肉瘤英文名稱:HOS
Sipeimine 西貝母堿61825-98-720mg
Solar Fluor 750(效果同Alexa Fluor 750)琥珀酰亞胺酯1 mg支
Isochlorogenic acid A 異綠原酸A2450-53-520mg
Metronidazole 25g瓶