詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
胱天蛋白酶1(CASP1)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D1013 |
英文名稱:Recombinant Caspase 1 (CASP1)
ICE; IL1BC; IL1-BC; P45; Interleukin 1 Beta Converting Enzyme; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Interleukin-1 beta convertase
型號(hào):GOY-01D1013
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
細(xì)胞凋亡
感染免疫
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì), 染色體
預(yù)測(cè)分子量:21.6kDa
實(shí)際分子量:23kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Asn119~Asp296 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.05% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):6.8
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:核糖核酸酶P(RNASEP)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Ribonuclease P (RNASEP)
產(chǎn)品名稱:α1-抗胰(a1ACT)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Alpha-1-Antichymotrypsin (a1ACT)
產(chǎn)品名稱:線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2)
產(chǎn)品名稱:肌球蛋白ⅤA(MYO5A)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Myosin VA (MYO5A)
產(chǎn)品名稱:多功能肽酶2(PSMB9)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Proteasome subunit beta type-9 (PSMB9)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ATP酶鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMCA3抗體 PMCA3
磷酸化/抗體 Phosphoserine/threonine
PUM1蛋白抗體 Pumilio 1
核糖核酸結(jié)合蛋白1抗體 PTBP1
神經(jīng)叢蛋白B2抗體 Plexin B2
磷酸化p53結(jié)合蛋白1抗體 Phospho-p53BP1 (Ser1778)
PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白GOPC抗體 PIST
轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體 PAX6
腫瘤抑制基因p53抗體 p53 (FL-393)
激活受體4抗體 PAR4
多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體 PLAGL1
原鈣粘蛋白β5抗體 PCDHB5
胱天蛋白酶1(CASP1)重組蛋白小鼠HZ830大孔吸附樹(shù)脂500g瓶
Tea polyphenol 茶多酚84650-60-220mg
β-galactosidase β-半乳糖苷酶1KU瓶
TaqMan One Step RT-qPCR Kit200T支
L-Threonine L-72-19-5200mg
羊抗人原-FITC0.5ml支
進(jìn)口藍(lán)蓋試劑瓶500ml個(gè)
醋酸洋紅染色液100ml瓶
Epoxylathyrol 環(huán)氧續(xù)隨子醇28649-60-720mg
Atractylenolide I 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ73069-13-320mg
兔抗HRP1mg支
75cm2正方斜口不透氣培養(yǎng)瓶5個(gè)包