詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
碳酸酐酶ⅤA(CA5A)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D1116 |
英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase VA (CA5A)
CA-VA; CAVA; CAV; CA5; Carbonate dehydratase 5A, mitochondrial
型號:GOY-01D1116
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預測分子量:20.9kDa
實際分子量:20kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Arg7~Lys179 (Accession # P23589) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:脲酰丙酸酶β(UPB1)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Beta-ureidopropionase (UPB1)
產(chǎn)品名稱:S轉移酶α3(GSTa3)重組蛋白 物種:Chicken (Gallus,雞) 英文名稱:Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 3 (GSTa3)
產(chǎn)品名稱:磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Phosphoglycerate Mutase 2, Muscle (PGAM2)
產(chǎn)品名稱:丙二酰脫羧酶(MLYCD)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Malonyl Coenzyme A Decarboxylase (MLYCD)
產(chǎn)品名稱:鈣激活核苷酸酶1(CANT1)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Calcium Activated Nucleotidase 1 (CANT1)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
磷酸化體PSMβ7抗體 phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214)
磷酸化急性髓細胞白血病1蛋白抗體 phospho-RUNX1 (Ser266)
根蛋白抗體 Radixin
視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白2抗體 Rb2 p130
維甲酸受體G抗體 RXR gamma
Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關蛋白抗體 RASA1
磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關蛋白抗體 phospho-RASA1 (Tyr460)
環(huán)指蛋白87 RNF87
細胞衰老抑制基因蛋白抗體 RSL1D1
中間絲相關蛋白抗體 Repetin
磷酸化RhoA蛋白抗體 Phospho-RhoA(Ser188)
環(huán)指蛋白86 RNF86
碳酸酐酶ⅤA(CA5A)重組蛋白小鼠octyl -Sepharose CL-4B 辛基-糖凝膠 CL-4B25mL瓶
Stevenleaf 絞股藍皂苷(混合物)72063-39-920mg
Amylose 直鏈淀粉250mg瓶
Isopimpinellin 異茴芹內(nèi)酯482-27-920mg
Penicillin G Sodium salt 青G鈉鹽1g瓶
羊抗小鼠IgG(免疫血清)0.5ml支
超濾離心管 15ml-10KD15ml個
Aprotinin 抑制劑()5mg瓶
Cisplatin 100mg瓶
Lysozyme 1g瓶
Xylotetraose 木四糖22416-58-610mg
Potato Dextrose Agar 馬鈴薯葡萄糖(PDA)250g瓶
Penicillin G sodium salt 青G鈉鹽69-57-8100mg