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酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-10 13:38:01瀏覽次數(shù):273

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D1191 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:BAP31蛋白抗體 英文名稱:BAP31 0.1ml支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體 英文名稱:BCAT2 0.1mlB細(xì)胞淋巴瘤蛋白3抗體 英文名稱:Bcl3 0.1ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D1191

 

 

英文名稱:Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

LYAG; Acid Alpha-Glucosidase; Lysosomal Alpha-Glucosidase; Pompe Disease Glycogen Storage Disease Type II; Acid Maltase; Aglucosidase Alfa

型號(hào):GOY-01D1191

酶與激酶

代謝通路

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::溶酶體

預(yù)測(cè)分子量:18.5kDa

實(shí)際分子量:19kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Ala761~Asn919 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):5.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:亮氨酰tRNA合成酶(LARS)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Leucyl tRNA Synthetase (LARS)

產(chǎn)品名稱:組氨tRNA合成酶(HARS)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Histidyl tRNA Synthetase (HARS)

產(chǎn)品名稱:苯丙氨酰tRNA合成酶2(FARS2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Phenylalanyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (FARS2)

產(chǎn)品名稱:苯丙氨酰tRNA合成酶2(FARS2)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Phenylalanyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (FARS2)

產(chǎn)品名稱:苯丙氨酰tRNA合成酶2(FARS2)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Phenylalanyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (FARS2)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

Src家族相關(guān)磷酸化蛋白2抗體 SCAP2

SH3結(jié)構(gòu)域激酶結(jié)合蛋白1抗體 SH3KBP1

SLAP2抗體 SLAP2

淋巴細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 SLP76

磷酸化淋巴細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 phospho-SLP76 (Tyr145)

磷酸化淋巴細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 phospho-SLP76 (Tyr113)

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子7抗體 SOCS7

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)接頭蛋白2抗體 STAP2

固醇攜帶蛋白2抗體 SCP2

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體 SOCS5

SLAP蛋白抗體 SLAP

協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體 SLC4A4

酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白人Anthrone 蒽酮5g瓶

CollagenaseⅢ 膠原酶Ⅲ100mg支

Metaphosphoric acid 偏磷酸500g瓶

Pulchinenoside A 白頭翁皂苷A129724-84-120mg

普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain,中性紅法)2×100ml瓶

TE 緩沖液(PH=8.0)100ml瓶

雜交袋 100個(gè)/包15cm×25cm包

HE染色試劑盒3×100ml盒

N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)25g瓶

Vancomycin 鹽酸萬(wàn)古100mg支

Coumarin 豆素91-64-520mg

Tannase 單寧酶1g瓶

Sudan Ⅲ Ⅲ85-86-920mg

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