詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
腦啡肽酶(CD10)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D1239 |
英文名稱:Recombinant Neprilysin (CD10)
NEP; MME; CALLA; SFE; Atriopeptidase; Enkephalinase; Skin fibroblast elastase; Common Acute Lymphoblastic Leukemia Antigen; Membrane Metallo-Endopeptidase
型號(hào):GOY-01D1239
酶與激酶
神經(jīng)科學(xué)
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 染色體
預(yù)測(cè)分子量:46.6kDa
實(shí)際分子量:47kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Ala286~Val428 with N-terminal GST Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):7.2
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:N-肉豆蔻?;D(zhuǎn)移酶2(NMT2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant N-Myristoyltransferase 2 (NMT2)
產(chǎn)品名稱:酪氨酰DNA磷酸二酯酶1(TDP1)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Tyrosyl DNA Phosphodiesterase 1 (TDP1)
產(chǎn)品名稱:鈣5(CAPN5)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Calpain 5 (CAPN5)
產(chǎn)品名稱:天冬酰tRNA合成酶(NARS)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Asparaginyl tRNA Synthetase (NARS)
產(chǎn)品名稱:合酶(COASY)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Coenzyme A Synthase (COASY)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
跨膜蛋白16C抗體 TMEM16C
TRIM35蛋白抗體 TRIM35
分子伴侶復(fù)合體TCP-1α抗體 TCP1 alpha
睪特異激酶2抗體 TESK2
磷酸化肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2抗體 phospho-ARP2 (Thr237)
轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白TRRAP抗體 TRRAP
轉(zhuǎn)錄因子TBX6抗體 TBX6
癌/睪抗原113抗體 Tex14
磷酸化血管生成素受體2抗體 Phospho-TIE2 (Tyr1102)
激酶受體A抗體 TrkA
磷酸化血管生成素受體2抗體 Phospho-TIE2 (Tyr1108)
促甲狀腺素釋放激素抗體 TRH
腦啡肽酶(CD10)重組蛋白大鼠HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SF126(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:MOLT-4
小鼠黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:B16
V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
甲1α(MEP1α)重組蛋白英文名稱:Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)
麥康凱NO.3 規(guī)格: 250g 用途: 用于食品和環(huán)境樣本中沙門(mén)氏菌(傷除外)的選擇性增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003 中4.13,G...
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
溴化十六烷基三甲銨培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于綠膿桿菌及其它革蘭氏性非發(fā)酵菌的選擇性分離培養(yǎng)。(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版)
布氏肉湯 規(guī)格: 250g 用途: 用于空腸彎菌培養(yǎng)及運(yùn)動(dòng)性觀察。(GB、ISO)
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格: 2x5支 用途: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。
M9CA肉湯/M9CA BrothBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠肥大細(xì)胞細(xì)胞英文名稱:P815