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AMP激活蛋白激酶γ1(PRKAg1)重組蛋白人

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更新時間:2023-03-13 13:41:06瀏覽次數(shù):705

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D1394 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Gamma 1
物種 Homo sapiens (Human,人)    
AMP激活蛋白激酶γ1(PRKAg1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:神經(jīng)母細(xì)胞瘤源性分泌蛋白抗體 英文名稱:C1orf76 0.2ml染色質(zhì)修飾蛋白2B抗體 英文名稱:CHMP2B 0.2ml神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5抗體 英文名稱:CLN5 0.2ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

AMP激活蛋白激酶γ1(PRKAg1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D1394

 

 

英文名稱:Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Gamma 1 (PRKAg1)

AMPKG Non-Catalytic Subunit; 5'-AMP-activated protein kinase subunit gamma-1

型號:GOY-01D1394

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:30.4kDa

實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Arg70~Leu300 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):8.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)活性蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Active Glucosidase Alpha, Neutral AB (GaNAB)

產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)氨酶(TAT)活性蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Active Tyrosine Aminotransferase (TAT)

產(chǎn)品名稱:細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)活性蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Active Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2)

產(chǎn)品名稱:二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)活性蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Active Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH)

產(chǎn)品名稱:腺苷高半水解酶(AHCY)活性蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Active Adenosylhomocysteinase (AHCY)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白8抗體 SSX8

組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD3抗體 SMYD3

磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 phospho-STAT6(Thr645)

磷酸化原癌基因蛋白18 Phospho-Stathmin(Ser25)

/蛋白激酶38抗體 STK38

分選連接蛋白1抗體 SNX1

GTP酶激活因子STARD8抗體 STARD8

抑制劑A11抗體 SERPIN A11

S100鈣結(jié)合蛋白A6抗體 S100A6

S100鈣結(jié)合蛋白A11抗體 S100A11

鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)蛋白抗體 SCRO

S100鈣結(jié)合蛋白P抗體 S100P

AMP激活蛋白激酶γ1(PRKAg1)重組蛋白人腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fatty Acid Binding Protein 2, Intestinal (FABP2)

小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

緩沖蛋白胨水/緩沖蛋白胨水增菌液/BPW沙門氏菌前增菌培養(yǎng)和李氏菌前增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

高氏合成一號培養(yǎng)基/GAUZEˊs Medium 放線菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:THP-1

Columbianadin 二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯5058-13-920mg

DiI-LDL DiI標(biāo)記低密度脂蛋白500ug瓶

人成纖維瘤細(xì)胞英文名稱:HT1080

Anglne(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

補(bǔ)體受體2(CR2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Complement Receptor 2 (CR2)

小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SYBR Green II(10000×)100ul瓶

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