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彈性蛋白酶2A(ELA2A)重組蛋白小鼠

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更新時(shí)間:2023-03-13 14:42:16瀏覽次數(shù):156

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D1475 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) Recombinant Elastase 2A (ELA2A)
物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)    
彈性蛋白酶2A(ELA2A)重組蛋白小鼠公司正在出售的產(chǎn)品:卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體 英文名稱(chēng):CCDC64 0.1ml卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體 英文名稱(chēng):CCDC72 0.1ml卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體 英文名稱(chēng):CCDC74B 0.1ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

物種

貨號(hào)

彈性蛋白酶2A(ELA2A)重組蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D1475

 

 

英文名稱(chēng):Recombinant Elastase 2A (ELA2A)

ELA1; PE-1; CELA2A; Chymotrypsin-Like Elastase Family Member 2A

型號(hào):GOY-01D1475

酶與激酶

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:31.0kDa

實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Cys17~Asn271 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 80%

等電點(diǎn):8.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

核酸外切酶1(EXO1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Exonuclease 1 (EXO1)HEX1; hExoI物種:Human,人

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白英文名稱(chēng):Native Carbonic Anhydrase II (CA2)CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C物種:Human,人

胰島素降解酶(IDE)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Insulin Degrading Enzyme (IDE)Insulysin; Insulin Protease; Abeta-degrading protease; Insulinase物種:Mouse,小鼠

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

酸性磷酸酶樣蛋白2抗體 ACPL2 0.2ml

轉(zhuǎn)錄因子HEY2蛋白抗體 HEY2 0.2ml

活化蛋白C抗體 Activated protein C/PROC1 0.1ml

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體 C19orf24 0.2ml

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體 C1orf67/DNAH14 0.2ml

DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體 DRAM 0.2ml

伴侶蛋白9抗體 CPNE9 0.2ml

星形肌動(dòng)蛋白抗體 ASTN2 0.2ml

RASSF5抗體 RASSF5 0.2ml

囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體 VAPA 0.2ml

磷酸化上皮鈉通道β2抗體 phospho-SCNN1B(Thr615) 0.1ml

抑癌基因SNF2β抗體 SMARCA4/SNF2 beta/BRG1 0.2ml

彈性蛋白酶2A(ELA2A)重組蛋白小鼠Simvastatin 辛伐他丁1g瓶

小鼠臟器組織淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200ml/KIT盒

001×7強(qiáng)酸性乙烯系陽(yáng)離子交換樹(shù)脂500g瓶

Tetrahydrocucumin 四氫姜黃素36062-04-120mg

cAMP 環(huán)1g瓶

dNTPs Mix(2.5mM each)500ul支

L-Tryphan L-色73-22-3200mg

羊抗小鼠IgG10mg支

D-(+)-Cellobiose 纖維二糖5g瓶

Sirius Red 天狼猩紅5g瓶

Escin IA 七葉皂苷A123748-68-510mg

Inositol 肌醇100g瓶

Atractylenolide III 白術(shù)內(nèi)酯III73030-71-420mg

 


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