詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
碳酸酐酶Ⅸ(CA9)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D1522 |
英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase IX (CA9)
CA-IX; CAIX; MN; pMW1; P54/58N; Carbonic Dehydratase; Renal cell carcinoma-associated antigen G250; RCC-Associated Protein G250; Carbonate dehydratase IX
型號:GOY-01D1522
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:-
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Obg樣ATP酶1(OLA1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Obg Like ATPase 1 (OLA1)GTPBP9; DOC45; GTP-binding protein 9; DNA damage-regulated overexpressed in cancer 45物種:Human,人
Ⅲ組磷脂酶A2(PLA2G3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Group III (PLA2G3)GIII-SPLA2; sPLA2-III; Group 3 secretory phospholipase A2; Group III secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 3物種:Mouse,小鼠
周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)PSSALRE; CDKN5; Cell division protein kinase 5; Serine/threonine-protein kinase PSSALRE; Tau protein kinase II catalytic subunit;TPKII catalytic subunit物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
核蛋白p8抗體 NUPR1/p8 0.2ml
線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運蛋白6抗體 SLC25A6 0.2ml
心臟特異性抗體 Corin 0.2ml
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周期素D結(jié)合蛋白1抗體 CCNDBP1/GCIP 0.2ml
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體 CCDC144A 0.2ml
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FAM91A1蛋白抗體 FAM91A1 0.2ml
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腦紅蛋白(NGB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neuroglobin (NGB)
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖(VRBGA) 規(guī)格: 250g 用途: 用于阪崎腸桿菌的選擇性分離培養(yǎng)以及腸道菌的計數(shù)和鑒別(SN/T 1632.1-2005)。
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支原體基礎(chǔ)/Mycoplasma Broth Base禽胚組織制備的疫苗支原體檢測40克國產(chǎn)/進口
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SMC-1(人胸膜瘤細胞)5×106cells/瓶×2
3.5% NaC1蔗糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
胰酪胨大豆/大豆/胰蛋白胨大豆/TSA用于藥品、生物制品的無菌試驗250克國產(chǎn)/進口
293FT(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
鱗狀細胞抗原2(SCCA2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Squamous Cell Carcinoma Antigen 2 (SCCA2)
TPY液體培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 培養(yǎng)雙歧桿菌用于果糖-6-磷酸鹽磷酸酮酶(F6PPK)測定
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖(VRBGA) 規(guī)格: 250g 用途: 用于阪崎腸桿菌的選擇性分離培養(yǎng)以及腸道菌的計數(shù)和鑒別(SN/T 1632.1-2005)。