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Ⅴ組磷脂酶A2(PLA2G5)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-13 15:11:22瀏覽次數(shù):109

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D1558 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Phospholipase A2, Group V (PLA2G5)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
Ⅴ組磷脂酶A2(PLA2G5)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:2號(hào)染色體開放閱讀框24抗體 英文名稱:C2orf24 0.2ml2號(hào)染色體開放閱讀框60抗體 英文名稱:C2orf60 0.2ml磷酸化周期素依賴性激酶9抗體 英文名稱:Phospho-CDK9 (Thr29) 0.1ml

詳細(xì)介紹

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

Ⅴ組磷脂酶A2(PLA2G5)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D1558

 

 

英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Group V (PLA2G5)

PLA2-10; Calcium-dependent phospholipase A2; Group V phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 5

型號(hào):GOY-01D1558

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:17.3kDa

實(shí)際分子量:17kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly21~Ser138 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 80%

等電點(diǎn):8.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


以下是相關(guān)產(chǎn)品:

基質(zhì)金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1物種:Rat,大鼠

脂肪酸去飽和酶1(FADS1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fatty Acid Desaturase 1 (FADS1)D5D; FADS6; FADSD5; LLCDL1; TU12; Delta-5 Desaturase; Delta(5) fatty acid desaturase物種:Rat,大鼠

胱天8關(guān)聯(lián)蛋白2(CASP8AP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Caspase 8 Associated Protein 2 (CASP8AP2)CED-4; FLASH; RIP25; FLICE-Associated Huge Protein物種:Rat,大鼠

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 MLF1 Interacting Protein/PBIP1/KLIP 0.1ml

磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 phospho-Crkl(Tyr244) 0.1ml

胱抑素A/半抑制劑A抗體 Cystatin A 0.2ml

凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體 DAPK2 0.1ml

外胚層發(fā)育不良抗體 ED-1 0.1ml

粘著斑激酶抗體 FAK/PTK2 0.1ml

紅細(xì)胞生成素抗體 EPO 0.1ml

14-3-3蛋白抗體 14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 0.1ml

Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白R(shí)BPJK抗體 RBPJK/RBP-J 0.2ml

小鼠抗表皮生長(zhǎng)因子抗體 EGF 0.1ml

7抗體 Factor VII 0.1ml

脂肪細(xì)胞特異性粘附分子抗體 ASAM/ACAM 0.1ml

Ⅴ組磷脂酶A2(PLA2G5)重組蛋白人小鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

改良Y培養(yǎng)基/Y Medium Modified分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口

肝細(xì)胞HBV病毒株英文名稱:HEPG2.2.15

BEL-7404(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

補(bǔ)體成分2(C2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Complement Component 2 (C2)

叉框蛋白O3(FOXO3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Forkhead Box Protein O3 (FOXO3)

小鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

Calu-3(人肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)重組蛋白英文名稱:Recombinant Corticotropin Releasing Hormone (CRH)

小鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

哥倫比亞培養(yǎng)基/Columbia Agar Medium營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)基及溶血試驗(yàn),梭菌的檢測(cè)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

胰腺腺英文名稱:Panc10.05

人腺細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-231

 


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