詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
IL2誘導T-細胞激酶(ITK)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D1666 |
英文名稱:Recombinant IL2 Inducible T-Cell Kinase (ITK)
PSCTK2; EMT; LYK; T-cell-specific kinase; Tyrosine-protein kinase Lyk
型號:GOY-01D1666
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞質
預測分子量:59.3kDa
實際分子量:59kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Leu368~Leu625 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:5.1
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關產(chǎn)品:
糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白英文名稱:Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)GPMM; Phosphorylase,Glycogen; McArdle Syndrome,Glycogen Storage Disease Type V; Myophosphorylase物種:Rat,大鼠
龍蝦肽酶樣金屬內肽酶(ASTL)重組蛋白英文名稱:Recombinant Astacin Like Metallo Endopeptidase (ASTL)Ovastacin; Oocyte astacin; Astacin-Like Metalloendopeptidase物種:Human,人
造血細胞激酶(HCK)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hemopoietic Cell Kinase (HCK)JTK9; Hemaoietic cell kinase; p59-HCK/p60-HCK物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
卷曲螺旋結構域蛋白158抗體 CCDC158 0.2ml
FAM155A蛋白抗體 FAM155A 0.2ml
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5號染色體開放閱讀框35抗體 C5orf35 0.2ml
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20號染色體開放閱讀框43抗體 C20orf43 0.1ml
IL2誘導T-細胞激酶(ITK)重組蛋白小鼠標準胎牛血清200ml瓶
0.5M EDTA (PH8.0)100ml瓶
Catalpol 梓醇2415-24-920mg
Lactic acid DL-乳酸50-21-520mg
通用反轉錄試劑盒(M-MLV,不含Taq酶)50T瓶
vitamin C 維生素C50-81-720mg
羊抗人C3-RBITC0.5ml支
α-pinene α-蒎烯7785-26-40.5mL
姬姆薩原液100ml瓶
Fucoxanthin 巖藻黃素3351-86-810mg
Celecoxib 1g瓶
25MM有機濾膜(50張/盒)0.45um盒
MOPSO 3-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸25g瓶