神經(jīng)酰胺激酶(CERK)重組蛋白人

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ceramide Kinase (CERK)

LK4; hCERK; Lipid kinase 4; Acylsphingosine kinase

型號：GOY-01D1721

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學(xué)

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：19.7kDa

實際分子量：22kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser128~Ser278 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)NOS; nNOS; IHPS1; NC-NOS; N-NOS; bNOS; Neuronal NOS; Constitutive NOS; NOS type I; Nitric Ocide Synthase; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase NOS1物種：Mouse，小鼠

核糖核酸酶A11(RNASE11)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ribonuclease A11 (RNASE11)C14orf6物種：Human，人

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白英文名稱：Native Carbonic Anhydrase II (CA2)CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C物種：Rabbit，兔

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體 phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 0.1ml

凋亡蛋白OLFM44抗體 OLFM4 0.2ml

電壓門控鉀通道Kv4.1抗體 KCND1/Kv4.1 0.2ml

絲裂原活化蛋白激酶3K14抗體 MAP3K14/NFkB Inducing Kinase NIK 0.2ml

二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體 CXXC5 0.2ml

通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體 ALF/GTF2A1LF 0.1ml

腫瘤/抗原12家族2抗體 XAGE2 0.2ml

鞘氨醇激酶2抗體 SPHK2 0.2ml

特異性Y蛋白樣5抗體 TSPYL5 0.2ml

宿主細(xì)胞因子1抗體 HCF-1 0.2ml

蛋白激酶A錨定蛋白6抗體 AKAP6 0.2ml

Ras激酶抑制因子連接增強蛋白3抗體 CNKSR3 0.2ml

神經(jīng)酰胺激酶(CERK)重組蛋白人Sucrose 蔗糖 　　　　250g瓶

細(xì)胞過濾篩(不銹鋼)200目個

透析袋 扁寬24 截留分子量200000.5m/即用型管

96孔酶標(biāo)板(可拆)25塊/包塊

迪慶綿羊皮膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱：DQSHS1

厭氧肉肝湯/Anaerobic Beef Liver Broth250克國產(chǎn)/進口

人結(jié)腸耐藥英文名稱：HCT/Taxol

抗熒光衰減封片劑（含DAPI）25ml瓶

Hoechst 33258染色液(即用型)50ml瓶

5ml凍存盒36孔個

DH5α感受態(tài)細(xì)胞20×100ul袋

Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)

激活受體4(PAR4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)