詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
耦合因子6(CF6)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D1771 |
英文名稱:Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)
ATP5J; ATP5A; ATP5; ATPM; ATP Synthase,H+ Transporting,Mitochondrial Fo Complex,Subunit F6; ATP synthase-coupling factor 6, mitochondrial
型號:GOY-01D1771
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:16.2kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Met1~Ser108 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:>95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶2(CPT2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carnitine Palmitoyltransferase 2, Mitochondrial (CPT2)CPTASE; Carnitine O-Palmitoyltransferase 2; Carnitine palmitoyltransferase II物種:Rat,大鼠
鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β4肽(ATP1b4)重組蛋白英文名稱:Recombinant ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)X,K-ATPase subunit beta-m; X/potassium-transporting ATPase subunit beta-m物種:Rat,大鼠
胱天8(CASP8)重組蛋白英文名稱:Recombinant Caspase 8 (CASP8)CAP4; FLICE; MACH; MCH5; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 8; Apoptotic cysteine protease; FADD-homologous ICE/ced-3-like protease; MORT1-associated ced-3 homolog物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體 CCDC54/NYD-SP17 0.2ml
FRMD4A蛋白抗體 FRMD4A 0.2ml
羧肽酶X(M14家族2)抗體 CPXM2 0.2ml
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr53) 0.1ml
轉(zhuǎn)錄因子E3 TFE3 0.1ml
TTC33蛋白抗體 TTC33 0.2ml
核纖層蛋白A相關(guān)結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 PAS1C1 0.2ml
環(huán)指蛋白150抗體 RNF150 0.2ml
細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體 CNOT4 0.2ml
9號染色體開放閱讀框117抗體 C9orf117 0.2ml
16號染色體開放閱讀框48抗體 C16orf48 0.2ml
晚期包膜蛋白2B抗體 LCE2B 0.2ml
耦合因子6(CF6)重組蛋白大鼠亞鐵 規(guī)格: 250g 用途: 用于厭氧亞還原梭狀芽孢桿菌的檢測(SN/T1071-2002)
Coomassie brilliant blue G-250 考馬斯亮藍(lán)G-25010g瓶
Sodium 5-nitroguaiacolate 5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉25g瓶
結(jié)晶紫染色液(1%)10ml瓶
Sepharose CL-6B 交聯(lián)糖凝膠CL-6B100ml瓶
5-Fluorouracil 5-氟1g瓶
Cytidine 胞苷65-46-320mg
酵母基因組100T盒
尼龍篩網(wǎng)(1m×1m)500目包
L-Arabinose L-阿拉伯糖10g瓶
Madecassoside 羥基積雪草苷34540-22-220mg
Bromothymol Blue 溴百里酚藍(lán)25g瓶
Columbin 古倫賓546-97-420mg