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高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白(大腸桿菌

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更新時(shí)間:2023-03-15 16:53:32瀏覽次數(shù):180

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D2053 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant High Temperature Requirement Factor A1
物種 Escherichia coli(大腸桿菌)    
高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白(大腸桿菌公司正在出售的產(chǎn)品:凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 英文名稱:CARD6 0.2ml凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 英文名稱:CARD17 0.2ml4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體 英文名稱:C4orf34  0.2ml

詳細(xì)介紹

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白(大腸桿菌

Escherichia coli(大腸桿菌)

GOY-01D2053

 

 

英文名稱:Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)

HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1

型號(hào):GOY-01D2053

酶與激酶

物種:Escherichia coli(大腸桿菌)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:15.4kDa

實(shí)際分子量:16kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Ala10~Gly146 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):5.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


以下是相關(guān)產(chǎn)品:

基質(zhì)金屬9(MMP9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物種:Horse,馬

基質(zhì)金屬3(MMP3)真核蛋白英文名稱:Eukaryotic Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1物種:Human,人

蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz)PKC2; PKC-Z; PRKCZ; Protein Kinase M Zeta物種:Rat,大鼠

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

人腺細(xì)胞英文名稱:MCF-7

醋林 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98% Triptorelin Acetate

 大鼠胰島素細(xì)胞英文名稱:INS-1

鹽萬(wàn)古 質(zhì)量規(guī)格:≥900μg/mg,USP33,BR Vancomycin HCl

 牛奶蛋白胨/蛋白胨C/Peptonized milkBR100/500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

凡德他尼 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Vandetanib

 伊紅美蘭平板/EMB Agar Plate10塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

鹽萬(wàn)古(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 Vancomycin HCl

 /孢他啶/孢他定/孢噻甲羧肟/孢塔齊定/噻甲肟孢菌素//Ceftazidime添加于100mlHB41553毫克/支×5國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

酒石伐倫克林 質(zhì)量規(guī)格:>98% Varenicline Tartrate

 LIM培養(yǎng)基/賴氨吲哚動(dòng)力培養(yǎng)基/賴氨靛基質(zhì)動(dòng)力培養(yǎng)基/LIM Medium用于鏈球菌的分離培養(yǎng);細(xì)菌的賴氨、吲哚和動(dòng)力復(fù)合生化試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

酒石伐倫克林(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Varenicline Tartrate

 人胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

酒石長(zhǎng)春瑞賓/重酒石長(zhǎng)春瑞賓 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR Vinorelbine Tartrate

 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

重酒石長(zhǎng)春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Vinorelbine Tartrate

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白(大腸桿菌大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

2 ug pOPI3CAT pOPI3CAT 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

馬黃體生成素(LH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

2 ug pCMV-Flag-N pCMV-Flag-N 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

大鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基(TSB)  250ml*20瓶

豬白介素6(IL-6)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pNEBRX1-hygro pNEBRX1-hygro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   常溫保存

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

肉湯培養(yǎng)基D Broth medium D (Lactose monohydrate broth) 250g

 


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