Ⅻ組磷脂酶A2(PLA2G12)重組蛋白小鼠

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group XII (PLA2G12)

PLA2G12A; sPLA2-XII; GXII sPLA2; Group XIIA secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 12A

型號：GOY-01D2467

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：22.4kDa

實(shí)際分子量：22kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Gln26~Leu192 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：5.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

基質(zhì)金屬26(MMP26)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)Matrilysin-2; Endometase物種：Human，人

磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphoglycerate Mutase 1, Brain (PGAM1)PGAMA; PGAM-B; BPG-dependent PGAM 1; Phosphoglycerate mutase isozyme B物種：Human，人

N-酰基乙醇?；?NAAA)重組蛋白英文名稱：Recombinant N-Acylethanolamine Acid Amidase (NAAA)ASAHL; PLT; N-Acylethanolamine-Hydrolyzing Acid Amidase; N-Acylsphingosine Amidohydrolase Like; Acid ceramidase-like protein物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

M-NFS-60 (小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性)宋內(nèi)氏志賀氏菌 Shigella sonnei

對氨基水楊（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：UV法溶出度檢查 Pasiniazid

 植物桿菌 Lactobacillus plantarum始旋鏈霉菌 Streptomyces pristinaespiralis

曲通（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定 Trepibutone

 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桂美（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：溶出度檢查 CINAMETIC ACID

 醋鈣不動(dòng)桿菌 Acinetobacter calcoaceticus人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

爾（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：供鑒別用 Trapidil

 鞘氨桿菌屬 Sphingobacterium sp.漢遜德巴利酵母 Aspergillus restrictus

奧特（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：UV法溶出度檢查 Orazamide

 黑曲霉 Aspergillus niger蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum大鼠神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基

地銨（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Dequalinium chloride

 RH-35(大鼠肝細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

氫小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 BERBERINE ACID SULFATE

Ⅻ組磷脂酶A2(PLA2G12)重組蛋白小鼠500支 2.0 mL RNase-free 離心管  常溫

1瓶 Sp2/0-Ag14細(xì)胞株 Sp2/0-Ag14 低溫運(yùn)輸和保存

100μL Doxorubicin（ Adriamycin ）阿 Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

2 ug pYES6/CT pYES6/CT 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

5次 大提柱式細(xì)菌RNAout Maxi Column Bacterial RNAOUT 4℃保存

人白介素23受體(IL-23R)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

鳥類催乳素(PRL/LTH)免疫試劑盒

馬胺2,3-雙加氧1(IDO1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

2 ug pCMV5-Flag pCMV5-Flag 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

250mL Antigen Retrieval Reagent，5X Antigen Retrieval Reagent，5X 常溫保存

2 ug pLVTHM pLVTHM 低溫運(yùn)輸，-20℃保存