詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
血管非炎性蛋白2(VNN2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2544 |
英文名稱:Recombinant Vanin 2 (VNN2)
FOAP-4; GPI-80; Pantetheinase; Vascular Non-inflammatory Molecule 2; Glycosylphosphatidyl inositol-anchored protein GPI-80
型號:GOY-01D2544
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜
預(yù)測分子量:38.3kDa
實(shí)際分子量:38kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Gln23~Pro329 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):5.4
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
蛋白牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶Ⅰβ(PGGT1b)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Geranylgeranyltransferase Type I Beta (PGGT1b)GGTI; BGGI; GGTase 1 β-subunit; Type I protein geranyl-geranyltransferase subunit beta物種:Human,人
乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lactate Dehydrogenase A (LDHA)LDH-A; LDH-M; LDH1; PIG19; Cell proliferation-inducing gene 19 protein; LDH muscle subunit; Renal carcinoma antigen NY-REN-59物種:Rat,大鼠
血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶2(ADAMTS2)重組蛋白英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 2 (ADAMTS2)hPCPNI; PCINP; ADAM-TS2; NPI; Procollagen I N-Proteinase; Procollagen N-Endopeptidase; Procollagen I/II amino propeptide-processing enzyme物種:Cattle,牛
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus嗜滲正青霉 Eupenicillium osmophilum
咽側(cè)體抑制素Ⅳ 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Allatostatin IV
微量BCA蛋白定量試劑盒大豆慢生根瘤菌
糊精肽,人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Amylin,human
煙曲霉 Aspergillus fumigatus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Angiotensin ConvertingEnzyme Inhibitor
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞人晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
血管緊張素A 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Angiotensin A
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum谷氨棒桿菌型
血管緊張素原(1-14),大鼠 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Angiotensinogen (1-14) ,Rat
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維蘇云金芽胞桿菌猝倒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. sotto
肯特肽抗體 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Anti-Kentsin
泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
心房利鈉肽(1-28),大鼠 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Atrial Natriuretic Peptide (1-28),rat
新型隱球酵母 Cryptococcus neoformans香菇 Lentinula edodes
心房利鈉肽(126-149) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Atrial Natriuretic Peptide (126-149) (rat)
血管非炎性蛋白2(VNN2)重組蛋白人2 ug pLNCX pLNCX 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
大鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2 ug pcDNA4/HisMax B pcDNA4/HisMax B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
白重鏈可變區(qū)(IgHV)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人胃蛋白(PG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠肥大細(xì)胞類胰蛋白(MCT)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬受體5(SSR5)免疫試劑盒
小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
100uL 小麥泛素基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
2 ug pDsRed2-ER pDsRed2-ER 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)