肝臟磷酸果糖激酶(PFKL)重組蛋白人

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphofructokinase, Liver (PFKL)

PFK-B; 6-phosphofructokinase type B; Phosphofructo-1-kinase isozyme B; Phosphohexokinase

型號(hào)：GOY-01D2574

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：45.5kDa

實(shí)際分子量：43kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ala2~His390 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

17-β-羥基類固醇脫氫酶2(HSD17b2)重組蛋白英文名稱：Recombinant 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 2 (HSD17b2)EDH17B2; HSD17; Estradiol 17-Beta-Dehydrogenase 2; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 9C,Member 2; 20 alpha-hydroxysteroid dehydrogenase物種：Mouse，小鼠

周期素依賴性激酶抑制因子3(CDKN3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3 (CDKN3)CDI1; CIP2; KAP1; CDK2-Associated Dual Specificity Phosphatase; Kinase Associated Phosphatase; Cyclin-dependent kinase interactor 1; Cyclin-dependent kinase-interacting 2物種：Human，人

磷酸肌醇-3-激酶2β肽(PIK3C2b)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Beta Polypeptide (PIK3C2b)C2-PI3K; PI3K-C2beta; Phosphoinositide 3-kinase-C2-beta物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica

N-代丁二酰亞(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR N-Iodosuccinimide

 NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

N',N-二甲基甘氨鹽鹽(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR N-N-Dimethylglycine hydrochloride

 苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti泡盛曲霉 Aspergillus awamori

正辛基-beta-D-麥牙糖苷(>98% (HPLC),BC) 質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BC n-Octyl-b-D-malyranoside

 桿菌屬 Lactobacillus sp.MDBK(牛腎細(xì)胞)

正壬基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC n-Nonyl-beta-D-malyranoside

 NCI-H661(人大細(xì)胞肺細(xì)胞)淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC Nonyl β-D-glucopyranoside

 蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensisHEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)

正十三基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC n-Tridecyl-b-D-malyranoside (e)

 淡青鏈霉菌 Streptomyces glaucescens釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

辛二(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Octanedioic acid

 人回盲腸細(xì)胞出芽短梗霉=出芽茁霉 Aureobasidium pullulans

橄欖油 質(zhì)量規(guī)格：商品級(jí) Olive oil

肝臟磷酸果糖激酶(PFKL)重組蛋白人2 ug pLOX-gfp-iresTK pLOX-gfp-iresTK 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

1mL TCEP 鹽酸膦 TCEP•HCl -20℃保存

人β-防御素1(DEFB1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

250mL TE Buffer,20X,pH7.6 TE Buffer,20X,pH7.6 常溫保存

1 管 C41(DE3)大腸桿菌 C41(DE3) E.coli Strain -80℃保存

50mL 苯基介質(zhì) Pheny Medium 常溫保存

500mL Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.4  Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.4  常溫保存

T1N3肉湯 T1N3 Broth 250g

溶液（20mg）  1ml*5

2 ug pDG1363 pDG1363 低溫運(yùn)輸，-20℃保存