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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01D3037 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Eukaryotic Eosinophil Peroxidase (EPX) |
| 物種 | Mus musculus (Mouse，小鼠) |
詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶(EPX)真核蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse，小鼠) | GOY-01D3037 |
英文名稱：Eukaryotic Eosinophil Peroxidase (EPX)
EPO; EPP; EPX-PEN; EPER
型號(hào)：GOY-01D3037
酶與激酶
物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)
來(lái)源：真核表達(dá)
宿主CHO Cell
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量：33.4kDa
實(shí)際分子量：66kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽：Gln19~Arg300 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 97%
等電點(diǎn)：9.7
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品：
Eukaryotic Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)產(chǎn)品名稱：血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)真核蛋白物種：Rat，大鼠ACEH; ACEII; ACE-II; Peptidyl-Dipeptidase A; ACE-related carboxypeptidase; Angiotensin-converting enzyme homolog; Metalloprotease MPROT15
Recombinant Acid Phosphatase 2, Lysosomal (ACP2)產(chǎn)品名稱：溶酶體酸性磷酸酶2(ACP2)重組蛋白物種：Mouse，小鼠Lysosomal Acid Phosphatase
Recombinant Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)產(chǎn)品名稱：胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白物種：Human，人SOD-3; EC-SOD; Extracellular Superoxide Dismutase Cu-Zn
操作步驟：
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL～1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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10次 非變性法蛋白沉淀試劑盒 Non-Denaturing Protein Precipitation Kit 常溫保存
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