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詳細介紹
抗體制備過程：
1.材料與試劑
a．提取的動物 Ig
b．弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d．實驗動物 兔
e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）
商品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 產品分類 | 抗體來源 |
血紅素轉運蛋白5抗體 | 50ul、100ul、200ul | 抗體 / 一抗 | Rabbit |
規(guī)格 50ul 100ul 200ul
產品分類 抗體 / 一抗
英文名稱 ：HCP5
英文別名 ：HLA class I histocompatibility anti protein P5; HLA complex protein P5; Protein P5 1; HCP5_HUMAN.
交叉反應 ：Human
標記 ：Unconjugated
抗體來源：Rabbit
抗體類型：Polyclonal
免疫原：KLH conjugated synthetic peptide derived from human HCP5
純化方法：affinity purified by Protein A
亞型：IgG
性狀：Liquid
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 ：
HCP5 is a region present on chromosome 6p21.3 that is characterized by multiple duplicated e families. HCP5 (HLA class I histocompatibility anti protein P5), also known as P5-1, is a 132 amino acid protein that is encoded by a e mapping to human chromosome 6p21.33. Localizing within the MHC class I region, HCP5 is not structurally related to other MHC class I es, but does have high sequence similarity with HERV-L and HERV-16. HCP5 also has high sequence homology to retroviral Pol es, making it a possible candidate for interaction with HIV-1 through an antisense mechanism that prevents retrovirus transcription. Single-nucleotide polymorphisms (SNPs) to the region of the HCP5 e that corresponds with HLA-B has been linked to a lower HIV-1 viral set point. HCP5 is highly expressed in lymphoid tissues, spleen and activated lymphocytes, as well as B-cell and natural killer (NK) cell lines. |
免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
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抗體分子標記技術：
（一）原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
（二）準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；
（三）操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；
2.如果氧化反應損傷蛋白質，可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
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