免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品分類 | 抗體來(lái)源 |
腎小管間質(zhì)腎炎抗原抗體 | 50ul、100ul、200ul | 抗體 / 一抗 | Rabbit |
規(guī)格 50ul 100ul 200ul
產(chǎn)品分類 抗體 / 一抗
英文名稱 :TIN-Ag
英文別名 :TINAG; TIN AG; TIN-Ag; TIN1; TIN2; TINAG; TINAG_HUMAN; Tubulointerstitial nephritis anti.
交叉反應(yīng) :Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
標(biāo)記 :Unconjugated
抗體來(lái)源:Rabbit
抗體類型:Polyclonal
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human TIN-Ag
蛋白細(xì)胞定位:細(xì)胞漿
純化方法:affinity purified by Protein A
亞型:IgG
性狀:Liquid
濃度:1mg/ml
儲(chǔ)存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 :
Mediates adhesion of proximal tubule epithelial cells via integrins alpha3-beta1 and alphaV-beta3. This is a non catalytic peptidase C1 family protein. |
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Catalase (CAT)產(chǎn)品名稱:過(guò)氧化氫酶(CAT)重組蛋白物種:Mouse,小鼠酶與激酶
Recombinant Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1)產(chǎn)品名稱:丙糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)重組蛋白物種:Mouse,小鼠TIM; Triose-phosphate isomerase
Recombinant Caspase 8 (CASP8)產(chǎn)品名稱:胱天8(CASP8)重組蛋白物種:Rat,大鼠CAP4; FLICE; MACH; MCH5; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 8; Apoptotic cysteine protease; FADD-homologous ICE/ced-3-like protease; MORT1-associated ced-3 homolog
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為殘基,殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
中性紅染色液規(guī)格:100ml
艾黃素;Artemisetin 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
CHL(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
β-桉葉;β-Eudesmol 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽細(xì)胞系
澳洲茄邊堿;solamargine 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
小鼠角膜內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
澳洲茄;solasodine 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
人子宮頸表細(xì)胞英文名稱:ME-180
澳洲茄堿;Solasonine 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
Schenk&Hildebrandt Vitamin MixBR100毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
阿魏鈉;Sodium ferulic 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞gersion
精;Cineole 規(guī)格: 0.1ml 訂購(gòu)|咨詢
小鼠骨髓瘤淋巴細(xì)胞英文名稱:N-H
阿魏;Ferulic acid 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢
腎小管間質(zhì)腎炎抗原抗體小鼠血纖蛋白(fibrin)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
山羊補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
犬基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
100mL HEPPSO Buffer,0.2M,pH8.5 HEPPSO Buffer,0.2M,pH8.5 常溫保存
50T 丙型脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pECFP-MEM pECFP-MEM 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
牛黃體生成素(LH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
人甘免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
200mL 菌體內(nèi)毒素清除劑 Bacterial Endotoxin Erasol 常溫
cary-blair(液體) 10ml*20支
山羊白介素1β(IL-1β)免疫試劑盒