免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 產(chǎn)品分類(lèi) | 抗體來(lái)源 |
KLHDC3蛋白抗體 | 50ul、100ul、200ul | 抗體 / 一抗 | Rabbit |
規(guī)格 50ul 100ul 200ul
產(chǎn)品分類(lèi) 抗體 / 一抗
英文名稱(chēng) :KLHDC3
英文別名 dJ20C7.3; hPEAS; kelch domain containing 3; Kelch domain-containing protein 3; KLDC3_HUMAN; KLHDC3; PEAS; Protein Peas; RP1-20C7.3; Testis intracellular mediator protein.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep
標(biāo)記 Unconjugated
抗體來(lái)源 Rabbit
抗體類(lèi)型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KLHDC3
蛋白細(xì)胞定位 細(xì)胞漿
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲(chǔ)存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 :
The protein encoded by this gene contains six repeated kelch motifs that are structurally similar to recombination activating gene 2, a protein involved in the activation of the V(D)J recombination. In mouse, this gene is found to be expressed specifically in testis. |
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
相關(guān)產(chǎn)品:
人17-羥基孕烯醇酮ELISA試劑盒 17-HP ELISA Kit人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測(cè)試劑盒 78-5000 pg/mL人淀粉樣蛋白A-低密度脂蛋白試劑盒ELISA SAA-LDL ELISA Kit
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為殘基,殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是公司正銷(xiāo)售的產(chǎn)品:
ELISA Kit for Human Annexin A5小鼠Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒,英文名:FⅧ ELISA Kit
9-氨基 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
ELISA Kit for Human Chondroadherin小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒,英文名:Methylase ELISA Kit
白頭翁皂苷E-3 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
ELISA Kit for Human CAMPATH-1 antigen小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA試劑盒,英文名:α Manase ELISA Kit
23-羥基白樺 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
ELISA Kit for Human Complement component C8 alpha chain小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒,英文名:MCP-4/CCL13 ELISA Kit
1,3-O-二啡??鼘?訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
ELISA Kit for Human Cytochrome P450 3A4小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(FGF9)ELISA試劑盒,英文名:FGF9 ELISA Kit
葒草素-2"-0-B-L半乳糖苷 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
ELISA Kit for Human DNA nucleotidylexotransferase小鼠乙酰羧化酶α(ACACα)ELISA試劑盒,英文名:ACACα ELISA Kit
木蘭脂素 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
ELISA Kit for Human Fibroblast growth factor 3小鼠天冬氨轉(zhuǎn)氨酶(AST)ELISA試劑盒,英文名:AST ELISA Kit
對(duì)羥基 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥99%;100mg
ELISA Kit for Human Follistatin-related protein 3小鼠Ⅹ(F10)ELISA試劑盒,英文名:F10 ELISA Kit
L-鼠李糖 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg
KLHDC3蛋白抗體50T 柯薩奇病毒A16型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
去氧膽酸鹽瓊脂(DC) Desoxycholate Lactose Agar 250g
1瓶 NCI-H2087細(xì)胞株 NCI-H2087 低溫運(yùn)輸和保存
2 ug pBAD33 pBAD33 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1瓶 C-33 A [C33A]細(xì)胞株 C-33 A [C33A] 低溫運(yùn)輸和保存
100mL 病毒沉淀劑 Virus Precipitation Reagent 4℃保存
雞熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒
大鼠過(guò)氧化氫(CAT)免疫試劑盒
1瓶 Hep 3B2.1-7細(xì)胞株 Hep 3B2.1-7 低溫運(yùn)輸和保存
液體連四硫酸鹽培養(yǎng)基 Fluid Tetrathionate Medium 250g
豬熱休克蛋白60,線(xiàn)粒體(HSPD1/Hsp-60)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝