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中文名稱 | 黑素細胞特異性轉(zhuǎn)運蛋白抗體 |
英文名稱 | P protein |
規(guī)格 | 50ul 100ul 200ul |
產(chǎn)品分類 | 抗體 / 一抗 |
英文別名 BEY; BEY1; BEY2; BOCA; D15S12; EYCL; EYCL2; EYCL3; eye color 2 (central brown); eye color 3 (brown); hair color 3 (brown); HCL3; Melanocyte-specific transporter protein; OCA2; oculocutaneous albinism II;
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
標記 Unconjugated
抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human P protein
蛋白細胞定位 細胞膜
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 This gene encodes the human homologue of the mouse p (pink-eyed dilution) gene.
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備 | 2. 免疫動物 | 4. 免疫血清 |
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。 | 常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。 3. 免疫血清的收集 一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。 | 純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化 ,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有 高效,特異性強,純度高的特定。接著要 鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、 純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建 議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。 |
抗體作用:
1、中和毒素和阻止病原體入侵,抗體在體外可發(fā)生各種抗原、抗體結(jié)合反應(yīng),有利于抗原或抗體檢測、功能判斷,在體內(nèi)可中合毒素、阻斷病原體入侵、清除病原微生物。
2、激活補體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物,使細胞溶解破壞,抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,可通過經(jīng)典途徑激活補體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應(yīng)功能。
3、調(diào)理吞噬和抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒性作用,調(diào)理作用是指IgG抗體的FC段與中性粒細胞、巨噬細胞表面下段FC受體結(jié)合,從而增強吞噬細胞的吞噬作用??贵w依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒性作用是指具有殺傷活性的細胞,如NK細胞,通過其表面的FC受體,識別包被于靶細胞表面抗原上的抗體FC段,直接殺傷靶細胞。
4、介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)。
5、穿過胎盤屏障和黏膜,IgG是能夠通過胎盤的抗體,對于新生兒的抗感染具有重要意義。
6、分泌型的IgA可通過呼吸道和消化道黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
優(yōu)勢:
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一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機體產(chǎn)生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,由B細胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團,而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結(jié)合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設(shè)計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當(dāng)一抗結(jié)合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
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