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原代細胞保存的主要方法之一細胞凍存2017/5/25
利用凍存技術將原代細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其...
原代細胞培養(yǎng)基的保存方法分析2017/5/23
原代細胞培養(yǎng)基的保存方法分析1.干粉,買了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我認為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。2.配好的無血清培養(yǎng)基一定保存在4度,保存不要超過3個月。用時根據(jù)...
原代細胞如何消除組織培養(yǎng)的污染2017/5/18
原代細胞當重要的培養(yǎng)污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生...
哪些方法可以使細胞適應無血清培養(yǎng)基2017/5/16
1.細胞株直接適應法式—將細胞直接從添加血清的培養(yǎng)基轉換到無血清培養(yǎng)基中。2.連續(xù)適應或循序隔絕法—分幾步將細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉換到無血清培養(yǎng)基中。與直接適應法相比較,連續(xù)適應法對于細胞更溫和些。...
干細胞過濾器的產(chǎn)品優(yōu)勢2017/5/9
干細胞過濾器是一種用于細胞過濾和分離的微流體器件。本產(chǎn)品由一個封閉的流體通道作為細胞過濾器腔體,1、在細胞過濾器腔體的兩端設有流體的輸入端口;2、和流體輸出端口;3、在流體的輸入端口和流體輸出端口之間...
不同細胞培養(yǎng)基的除菌方式及注意事項2017/5/4
細胞系培養(yǎng)基滅菌的方式分為高壓滅菌和膜過濾除菌,不同的培養(yǎng)基由于其營養(yǎng)成份不同,滅菌方式也可能不同。絕大多數(shù)細胞培養(yǎng)基不適宜高壓滅菌。因為高壓滅菌易破壞細胞培養(yǎng)基中的一些成份,如某些維生素等,因此,在...
人外周T細胞的分離與鑒定2017/4/27
材料:淋巴細胞株懸液、1%SRBC懸液、滅活之小牛血清、離心管、試管、吸管、載玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。方法(1)取上述配好之淋巴細胞懸液0.1ml于潔凈小試管中,加入1%SRBC懸液0.1ml...
原代細胞培養(yǎng)實驗器具清洗步驟2017/4/25
原代細胞實驗器具清洗l玻璃類1、主要有:培養(yǎng)瓶,血清瓶,小青瓶,移液管,離心管,試管,培養(yǎng)皿等。2、清洗步驟:泡在含有洗潔凈的自來水中→撈出來用毛刷將實驗器具各個面刷洗至少25遍→自來水沖洗25遍→過...
影響哺乳動物細胞復蘇的因素2017/4/20
影響哺乳動物原代細胞復蘇的因素包括:(a)細胞類型,(b)生長階段,(c)細胞處于細胞周期的哪個階段,(d)終懸液中的細胞數(shù)量和濃度。可通過優(yōu)化以上因素來提高復蘇細胞活力,另外,還需考慮凍存保護劑的特...
神經(jīng)細胞分散培養(yǎng)2017/4/18
(一)細胞系選材常用胚胎動物或新生鼠神經(jīng)組織。雞胚常用胚齡6-8d,新生鼠或胎鼠(12-14d)或人胚胎。不過也有認為與組織相關。如大白鼠胚胎以19d為宜,小鼠以18d為宜,大鼠紋狀體以10d為宜;若...
巨核細胞基本生理功能分析2017/4/13
巨核細胞株雖然在骨髓的造血細胞中為數(shù)zui少,僅占骨髓有核細胞總數(shù)的0.05%,但其產(chǎn)生的血小板卻對機體的止血功能極為重要。每個巨核細胞均可產(chǎn)生1000-6000個血小板。生成血小板的巨核細胞也是從骨...
原代細胞核的分離提取2017/4/11
(一)原代細胞操作步驟1.用頸椎脫位的方法處死小白鼠后,迅速剖開腹部取出肝臟,剪成小塊(去除結締組織)盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯中,反復洗滌,盡量除去血污,用濾紙吸去表面的液體。2.將濕重約1...
程序降溫盒提高細胞凍存的存活率的方法2017/4/6
1.細胞系實驗室凍存盒平時放4度,需要凍細胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉移至液氮,貴重的細胞盡快轉移,不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-8...
原代細胞培養(yǎng)玻璃器皿的清洗2017/4/1
①原代細胞浸泡:新購進的玻璃器皿常帶有灰塵,呈弱堿性,或帶有鉛、碑等有害物質,故先用自來水浸泡、水洗,然后再用2%~5%鹽酸浸泡或煮沸30min,水洗。要領:培養(yǎng)用后的玻璃器皿要立即泡入清水中,使下道...
原代細胞線粒體膜勢能的檢測2017/3/30
原代細胞線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用,多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發(fā)生凋亡,而線粒體跨膜電位的下降,被認為是細胞凋亡級聯(lián)反應過程中zui早發(fā)生的事件,它發(fā)生在細胞核凋亡特征(染色質濃...

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