5-羥色胺可調(diào)控造血腫瘤細(xì)胞移植

腫瘤細(xì)胞是一群能自我更新并分化為各種成熟血細(xì)胞的多能干細(xì)胞。基于其重建血液系統(tǒng)的能力，造血干細(xì)胞移植已成功用于治療白血病等惡性血液疾病。如何體外誘導(dǎo)和擴(kuò)增足夠數(shù)量且有功能的HSPCs，是臨床上惡性血液疾病治療的瓶頸，也是基礎(chǔ)科學(xué)研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)之一。其目前尚未成功的根本原因在于人們對HSPCs產(chǎn)生和擴(kuò)增的調(diào)控機(jī)制認(rèn)識仍不全面。因此，應(yīng)用模式動物深入和系統(tǒng)地研究體內(nèi)HSPCs產(chǎn)生和擴(kuò)增過程及其調(diào)控機(jī)制，將對體外誘導(dǎo)并擴(kuò)增有功能的HSPCs具有十分重要的指導(dǎo)意義。

中國科學(xué)院動物研究所研究員劉峰領(lǐng)導(dǎo)的血液與心血管發(fā)育研究組早期的工作證實(shí)，參與5-羥色胺（5-HT）合成的轉(zhuǎn)錄因子Fev（哺乳動物的Pet1）是斑馬魚和人HSPCs發(fā)育所必需的關(guān)鍵因子（Blood, 2013）；zui近的合作研究發(fā)現(xiàn)FEV僅在出生前起源的白血病細(xì)胞表達(dá)，表明其可以作為白血病起源的診斷標(biāo)記（Leukemia, 2016）。此外，有報道表明，5-HT處理體外培養(yǎng)的人臍帶血HSPCs能促進(jìn)其克隆形成能力，但機(jī)制不明。

為深入探究5-HT與哺乳動物HSPCs發(fā)育的關(guān)系，劉峰研究組通過體外集落形成和脾結(jié)節(jié)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，5-HT處理后的小鼠主動脈-性腺-中腎區(qū)（AGM）中HSPCs克隆形成能力顯著增強(qiáng)。色氨酸羥化酶2（Tph2）是5-HT合成的限速酶。在其突變體胚胎中（tph2+/-和pet1-cre;tph2+/fl），AGM區(qū)造血簇大小和數(shù)目顯著降低，HSPCs重建受體小鼠造血能力顯著下降。為確定調(diào)控HSPCs的5-HT的來源，該研究發(fā)現(xiàn)Pet1、Tph2和AAAD等（參與5-HT合成的重要轉(zhuǎn)錄因子和合成酶）在AGM區(qū)內(nèi)皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)。

進(jìn)一步研究表明，內(nèi)皮細(xì)胞特異性缺失tph2（vec-cre;tph2+/fl）的小鼠胚胎中，5-HT在AGM區(qū)內(nèi)皮細(xì)胞中會顯著降低，HSPCs的發(fā)育受到影響。因此，AGM區(qū)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的5-HT參與調(diào)控胚胎期HSPCs的發(fā)育。

RNA-seq及生化實(shí)驗(yàn)證實(shí)，AGM區(qū)5-HT的降低會激活A(yù)KT-Foxo1介導(dǎo)的促凋亡通路，致使小鼠胚胎造血簇中HSPCs凋亡顯著增加。這一過程是由5-HT的受體Htr介導(dǎo)的。此外，腫瘤細(xì)胞研究過程中意外地發(fā)現(xiàn)，盡管在tph2-/-和pet1-cre;tph2fl/fl胚胎中，凋亡信號顯著上調(diào)，但AGM區(qū)造血簇數(shù)量卻是正常的。深入研究發(fā)現(xiàn)，在*缺失tph2 的胚胎中，Shh-Nkx2.2-Lmx1b-Pet1通路因負(fù)反饋調(diào)控而上調(diào)，ERK信號被激活，導(dǎo)致造血簇中HSPCs增殖加快，進(jìn)而使得tph2-/-胚胎中造血發(fā)育缺陷得到恢復(fù)。
過敏毒素C/補(bǔ)體C抗體    英文縮寫：    C anaphylatoxin
卵巢癌抗原抗體    英文縮寫：    CA125
粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體    英文縮寫：    CTNNAL1
21號染色體開放閱讀框69抗體    英文縮寫：    C21orf69
細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體    英文縮寫：    CCRK
乳腺癌相關(guān)抗原抗體    英文縮寫：    MUC1
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)    英文縮寫：    Caspase-6 (NT)
周期素依賴性激酶3抗體    英文縮寫：    CDK3
鈣調(diào)磷酸酶抗體    英文縮寫：    Calcineurin A
鈣蛋白酶1抗體    英文縮寫：    Calpain 1
鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體    英文縮寫：    Calponin 1
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（C端）    英文縮寫：    Caspase-6 (CT)
周期素A2抗體    英文縮寫：    Cyclin A2
腫瘤細(xì)胞