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公司動(dòng)態(tài)

分享活腫瘤細(xì)胞表面受體配體結(jié)合檢測(cè)的新技術(shù)

閱讀:362          發(fā)布時(shí)間:2017-11-1

Tag-lite是SNAP-Tag與HTRF技術(shù)相結(jié)合,用來(lái)進(jìn)行活腫瘤細(xì)胞表面受體分析的一種技術(shù)。

    SNAP和CLIP是小的融合標(biāo)簽蛋白,可特異地與底物通過芐甲基不可逆共價(jià)結(jié)合, 其底物分別為芐甲基鳥嘌呤(BG)和芐甲基胞嘧啶(BC)。由于底物可與各種染料形成衍生物,這樣,通過共價(jià)反應(yīng),染料就標(biāo)記到SANP或CLIP上了。

    SNAP或CLIP可以非常容易地融合到蛋白質(zhì)的N端或C端,所以我們可以構(gòu)建SNAP或CLIP與目標(biāo)蛋白的表達(dá)載體。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、融合蛋白表達(dá)后,加入標(biāo)記了熒光染料的底物,我們可以得到標(biāo)記了熒光染料的目標(biāo)蛋白。

    在Tag-lite技術(shù)中,用pSNAP或pCLIP與編碼目標(biāo)GPCR的基因構(gòu)建質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,就可表達(dá)N端融合了SNAP或CLIP的目標(biāo)GPCR。

    底物(BG或BC)與HTRF熒光染料反應(yīng)形成衍生物,例如與供體(Donor)鋱穴狀化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白與其反應(yīng),則Tb被標(biāo)記到GPCR上。加入受體(Acceptor)熒光染料標(biāo)記的配體,腫瘤細(xì)胞可以進(jìn)行受體配體結(jié)合實(shí)驗(yàn)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,HTRF的能量受體(Acceptor)與底物形成衍生物,則Acceptor被標(biāo)記到GPCR上,可以進(jìn)行GPCR同源二聚化實(shí)驗(yàn)。除此之外,我們還可以進(jìn)行GPCR異源二聚化實(shí)驗(yàn)、寡聚化實(shí)驗(yàn)以及內(nèi)源化實(shí)驗(yàn)等細(xì)胞表面受體分析。
鹽酸氟奮乃靜標(biāo)準(zhǔn)品    146-56-5     125mg    Fluphenazine Hydrochloride 
鹽酸氟奮乃靜庚酸酯標(biāo)準(zhǔn)品    3105-68-8     125mg    
鹽酸氟西泮標(biāo)準(zhǔn)品    1172-18-5     200mg    Flurazepam Hydrochloride CIV
鹽酸氟西汀標(biāo)準(zhǔn)品    56296-78-7     200mg    Fluoxetine Hydrochloride 
鹽酸格拉司瓊標(biāo)準(zhǔn)品    107007-99-8     150mg    Granisetron Hydrochloride 
鹽酸胍法辛標(biāo)準(zhǔn)品    29110-48-3     125mg    Guanfacine Hydrochloride 
鹽酸海克卡因標(biāo)準(zhǔn)品    532-76-3     1g    Hexylcaine Hydrochloride
鹽酸環(huán)苯扎林標(biāo)準(zhǔn)品    6202-23-9    200mg    Cyclobenzaprine Hydrochloride
鹽酸環(huán)丙沙星標(biāo)準(zhǔn)品    86393-32-0    400mg    Ciprofloxacin Hydrochloride
鹽酸環(huán)噴托酯標(biāo)準(zhǔn)品    5870-29-1    300mg    Cyclopentolate Hydrochloride
鹽酸黃連素標(biāo)準(zhǔn)品    633-65-8    50mg    Berberine Chloride
鹽酸黃酮哌酯標(biāo)準(zhǔn)品    3717-88-2     200mg    Flavoxate Hydrochloride
腫瘤細(xì)胞

 

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