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Tag-lite是SNAP-Tag與HTRF技術相結合,用來進行活腫瘤細胞表面受體分析的一種技術。
SNAP和CLIP是小的融合標簽蛋白,可特異地與底物通過芐甲基不可逆共價結合, 其底物分別為芐甲基鳥嘌呤(BG)和芐甲基胞嘧啶(BC)。由于底物可與各種染料形成衍生物,這樣,通過共價反應,染料就標記到SANP或CLIP上了。
SNAP或CLIP可以非常容易地融合到蛋白質(zhì)的N端或C端,所以我們可以構建SNAP或CLIP與目標蛋白的表達載體。質(zhì)粒轉染、融合蛋白表達后,加入標記了熒光染料的底物,我們可以得到標記了熒光染料的目標蛋白。
在Tag-lite技術中,用pSNAP或pCLIP與編碼目標GPCR的基因構建質(zhì)粒,轉染入細胞后,就可表達N端融合了SNAP或CLIP的目標GPCR。
底物(BG或BC)與HTRF熒光染料反應形成衍生物,例如與供體(Donor)鋱穴狀化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白與其反應,則Tb被標記到GPCR上。加入受體(Acceptor)熒光染料標記的配體,腫瘤細胞可以進行受體配體結合實驗。根據(jù)實驗目的,HTRF的能量受體(Acceptor)與底物形成衍生物,則Acceptor被標記到GPCR上,可以進行GPCR同源二聚化實驗。除此之外,我們還可以進行GPCR異源二聚化實驗、寡聚化實驗以及內(nèi)源化實驗等細胞表面受體分析。
鹽酸氟奮乃靜標準品 146-56-5 125mg Fluphenazine Hydrochloride
鹽酸氟奮乃靜庚酸酯標準品 3105-68-8 125mg
鹽酸氟西泮標準品 1172-18-5 200mg Flurazepam Hydrochloride CIV
鹽酸氟西汀標準品 56296-78-7 200mg Fluoxetine Hydrochloride
鹽酸格拉司瓊標準品 107007-99-8 150mg Granisetron Hydrochloride
鹽酸胍法辛標準品 29110-48-3 125mg Guanfacine Hydrochloride
鹽酸??丝ㄒ驑藴势?nbsp; 532-76-3 1g Hexylcaine Hydrochloride
鹽酸環(huán)苯扎林標準品 6202-23-9 200mg Cyclobenzaprine Hydrochloride
鹽酸環(huán)丙沙星標準品 86393-32-0 400mg Ciprofloxacin Hydrochloride
鹽酸環(huán)噴托酯標準品 5870-29-1 300mg Cyclopentolate Hydrochloride
鹽酸黃連素標準品 633-65-8 50mg Berberine Chloride
鹽酸黃酮哌酯標準品 3717-88-2 200mg Flavoxate Hydrochloride
腫瘤細胞
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