豬肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma hyopneumoniae
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機型決定，具體見使用方法）。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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實驗過程：
一、豬肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2．產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Cynaroside早期活化抗原CD69檢測試劑盒500mg

千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖苷 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 Oroxyloside

 wilforlide A氨汀硫醇標準品規(guī)格：規(guī)格：人Atonal蛋白的同源蛋白1(ATOH1)ELISA 試劑盒 0.2ml

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子3(TIMP3)BRD1  BRD1蛋白抗體規(guī)格:96T/48TAminobenzoate Potassium規(guī)格:1gCRaf原癌基絲蘇氨蛋白激酶檢測試盒10mg人高轉(zhuǎn)移性肝癌細胞，MHCC97H細胞1x10^6cells

Luteolin早期前列腺癌抗原2檢測試劑盒20mg

 Schenk&Hildebrandt MediumBR10升國產(chǎn)/進口

Luteolin阿米卡星標準品規(guī)格：規(guī)格：人芳基硫酯酶A(ASA)Polyclonal Antibody 0.2ml

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子2(TIMP2)BRP44  腦蛋白44抗體規(guī)格:96T/48TAminobenzoate Sodium規(guī)格:1gCREB調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄輔激活子1檢測試盒20mg人宮頸癌細胞，C33A細胞1x10^6cells

5(6)羧基四基羅丹明（混合物）5mg

 HT-1080(人纖維肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

C.L.E.D Medium Supplement1ml*5支四氫孕檢測試盒5mg白細胞介素10檢測試盒keyholelimpethemocyamin

>98%(GC)25g5MG葡萄糖6脫酶(G6PD)檢測試劑盒(6PGD校正比色法)coagulation factor Ⅸ

己二二甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC) Dimethyl adipate

GC Agar250卵脂檢測試盒5mg鑰孔蟲戚血藍蛋白檢測試盒keyholelimpethemocyaminIgGantibody

97%1g1g葡萄糖6脫酶(G6PD)檢測試劑盒(簡易微板法)coagulation factor Ⅷ

 載脂蛋白A1(APOA1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Apolipoprotein A1 (APOA1)

BLB Medium250禽流感H5N1檢測試盒5mg鑰孔蟲戚血藍蛋白IgG抗體檢測試盒Leptin
豬肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒澳洲茄;solasodine CAS號： 126170 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

澳洲茄邊堿;solamargine CAS號： 20311517 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

澳洲茄堿;Solasonine CAS號： 19121585 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

阿魏;Sodium ferulic CAS號： 24276844 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

桉油精;Cineole CAS號： 470826 規(guī)格： 0.1ml 訂購|咨詢

阿魏;Ferulic acid CAS號： 1135246 規(guī)格： 50mg 訂購|咨詢

阿魏松柏;coniferyl fer CAS號： 63644622 規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

保泰松;純品型;標準品;有證書 CAS號： 50339 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢

惡唑;純品型;標準品;有證書 CAS號： 723466 規(guī)格： 0.25g 訂購|咨詢

諾氟沙星;純品型;標準品;有證書 CAS號： 70458967 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢

氧氟沙星;純品型;標準品;有證書 CAS號： 82419361 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢

氯噠嗪;純品型;標準品;有證書 CAS號： 80320 規(guī)格： 0.25g 訂購|咨詢

結(jié)晶紫;純品型;標準品;有證書 CAS號： 548629 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢

二嘧啶;純品型;標準品;有證書 CAS號： 57681 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢

唑;純品型;標準品;有證書 CAS號： 72140 規(guī)格： 0.25g 訂購|咨詢