詳細(xì)介紹
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Abalone Herpes-like Virus(AbHV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
無(wú)色桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Achromobacter spp.
鮑氏不動(dòng)桿菌(鮑曼不動(dòng)桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒 Acinetobacter baumannii
魯氏不動(dòng)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Acinetobacter lwoffi
不動(dòng)桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Acinetobacter spp.
枝頂孢霉探針法熒光定量PCR試劑盒 Acremonium strictum
伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinobacillus actinomycetemcomitans
豬胸膜肺炎放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinobacillus pleuropneumoniae
馬杜拉放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomadura madurae
白樂杰馬杜拉放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomadura pelletieri
牛型放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomyces bovis
歐洲放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomyces europaeus
戈氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomyces gerencseriae
衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomyces israelii
內(nèi)氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomyces naeslundii
化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomyces pyogenes
放線菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Actinomyces spp.
腺伴隨病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 Adeno-associated Virus(AAV)
腺病毒A型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒C型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas hydrophila
斑點(diǎn)氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas punctata
滅鮭氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas salmonicida
Anti-Annexin IV 膜粘連蛋白 A4抗體 用于霍亂弧菌的生化試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) 霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250
Anti-Annexin V 膜粘連蛋白5抗體 用于霍亂弧菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) T1N1 Agar T1N1 瓊脂 250
Anti-Annexin VI 膜粘連蛋白 VI抗體 用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) T1N0 Broth T1N0 肉湯 250
Anti-Annexin V 重組膜粘連蛋白-5(人)抗體 用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) T1N3 Broth T1N3 肉湯 250
Anti-Anthrax 炭疽桿菌抗體 用于霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Arginine Dextrose Agar 精氨酸葡萄糖斜面瓊脂 100
Anti-Anthrax 炭疽菌抗體(采用活疫苗制備) 用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn)) mCPC Medium mCPC 培養(yǎng)基 250
Anti-alpha Adaptin 銜接蛋白α抗體 每瓶添加于100ml mCPC培養(yǎng)基中 mCPC Medium Supplement mCPC培養(yǎng)基添加劑 1ml*5
Anti-beta Adaptin/AP2 銜接蛋白β抗體 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng) 副溶血性弧菌瓊脂 250
Anti-Gamma-Adaptin 銜接蛋白γ抗體 用于副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng) 副溶血性弧菌增菌液 250
Anti-Apaf-1(CT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端) 用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用 Czapek Dox Agar 察氏瓊脂 250
Anti-Apaf-1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng) Toxin-Producing Medium 產(chǎn)毒培養(yǎng)基 250
Anti-Activated protein C 活化蛋白C抗體 用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Potato Dextrose Agar 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA) 250
Anti-Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗體 用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Salt Czapek Dox Agar 高鹽察氏瓊脂 250
Anti-Apelin receptor Apelin receptor抗體 用于真菌檢測(cè)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Sabouraud’s Agar 沙氏瓊脂培養(yǎng)基 250
Anti-APC/Adenomatous Polyposis Coli 腺瘤樣息肉抗體 用于真菌培養(yǎng) Corn Meat Medium 玉米粉瓊脂 250
Anti-APEX1 多功能DNA修復(fù)酶抗體 用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定 Rose Bengal Medium 孟加拉紅培養(yǎng)基 250
Anti-ATH III 凝血酶Ⅲ抗體 用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定 Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂 250
Anti-APG4B/AUTL1 細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白4B抗體 用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測(cè)定(Merck方法) Candida Elective Agar to Nickerson Candida Elective 瓊脂 250
Anti-APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 用于食品中真菌的培養(yǎng)(Merck方法) DTM Medium DTM培養(yǎng)基 250
Anti-APOD 載脂蛋白D抗體 用于食品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng) DRBC Agar DRBC瓊脂 250
Anti-APOH 載脂蛋白H抗體 用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)(Merck方法) Wort Agar WORT 瓊脂 250
Anti-APOE 載脂蛋白E抗體 用于真菌,特別是酵母菌的培養(yǎng)(Merck方法) Wort Broth WORT 肉湯 250
Anti-APOJ 載脂蛋白J抗體 用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)(ISO方法) YGC Agar YGC瓊脂 250
Anti-Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白抗體 用于飲料中真菌及酵母菌檢測(cè)(Acumedia方法) m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 改良綠色酵母菌和真菌肉湯 250
Anti-APP/ABPP 淀粉樣肽前體蛋白抗體 用于真菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) Littman Agar Littman 瓊脂 250
Anti-APP/ABPP APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體 用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)(Acumedia方法) DICHLORANGLYCEROL (DG-18) AGAR DG-18瓊脂 250
Anti-phospho-APP/ABPP(Tyr757) 磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) YM Agar YM瓊脂 250
Anti-phospho-APP/ABPP(Thr668) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法) YM11 Agar YM11瓊脂 250
Anti-APPL1 APPL1抗體 用于霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(Merck方法) OGY Agar OGY瓊脂 250
anti-AQP1 水通道蛋白1抗體 用于啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細(xì)菌的計(jì)數(shù) WL Nutrient Agar WL營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250
Anti-AQP2 水通道蛋白-2抗體 用于真菌檢測(cè) Sabouraud’s Agar,Modified 改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基 250
Anti-AQP3 水通道蛋白-3抗體 用于真菌檢測(cè)(Acumedia 方法) Sabouraud BHI Agar 沙氏BHI瓊脂 250
Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗體 用于四環(huán)素檢定中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Strain Medium(for B.Cereus) 菌種培養(yǎng)基 250
Anti-AQP5 水通道蛋白-5抗體 用于四環(huán)素殘留的微生物學(xué)檢定(SN標(biāo)準(zhǔn)) Tetracyline Examination Agar 四環(huán)素檢定瓊脂 250
Anti-AQP7 水通道蛋白-7抗體 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Glucose Tryptone Agar 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250
Anti-AQP9 水通道蛋白-9抗體 用于彎曲桿菌分離(SN標(biāo)準(zhǔn)) Brucella Agar 布氏瓊脂 250
Anti-AR 雄激素受體抗體 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標(biāo)準(zhǔn)) Brucella Broth 布氏肉湯 250
Anti-phospho-Androgen Receptor (Ser580) 磷酸化雄激素受體抗體 用于空腸彎曲菌的分離培養(yǎng)(SN 、GB標(biāo)準(zhǔn)) Skirrow Agar Base,Modified 改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ) 250
Anti-phospho-Androgen Receptor (Ser595) 磷酸化雄激素受體抗體 用于彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Camp-BAP Agar Base,Modified 改良Camp-BAP氏瓊脂基礎(chǔ) 250
Anti-ARHI ARHI蛋白抗體 用于彎曲桿菌的TTC試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) TTC Agar Base TTC 瓊脂基礎(chǔ) 250
Anti-AKR1B1 醛糖還原酶抗體 用于彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Glycine Medium 甘氨酸培養(yǎng)基 250
Anti-ARC ARC抗體 用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) H2S Test Medium 快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂 250
Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6抗體 用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Dnase Agar Base with Methyl Green DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ) 100
Anti-Arfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 馬尿酸鈉培養(yǎng)基 100
Anti-Arfaptin 2 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂 250
Anti-phospho-arfaptin 2(Ser260) 磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)(Merck方法) Bolton Selective Enrichment broth 波爾頓選擇性增菌肉湯 250
Anti-phospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體 用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法) CCDA Base CCDA基礎(chǔ) 250
Anti-Aromatase 芳香化酶抗體 每支添加于200mlCCDA基礎(chǔ)中 CCDA Supplement CCDA添加劑 2ml*10支
Anti-Aromatase 芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體 用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法) Campy-Cefex Agar Base Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ) 250
Anti-COX-2 細(xì)胞色素c氧化酶抗體 每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ)中 Campy-Cefex Supplement Campy-Cefex 添加劑 2ml*10
Anti-COX7A2 細(xì)胞色素c氧化酶COX7A2抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)(GB.SN標(biāo)準(zhǔn)) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP) 250
Anti-ARIP2a 激活素受體2A抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的MPN值測(cè)定 (SN標(biāo)準(zhǔn)) Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ) 250
Anti-Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) V-P Medium,Modified 改良V-P培養(yǎng)基 250
Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ) 250
Anti-Beta-arrestin 2 β-抑制蛋白2抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn) (GB標(biāo)準(zhǔn)) Casein Agar 酪蛋白瓊脂 250
Anti-ARIP2B 激活素受體2B抗體 用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Phenol Red Dextrose Broth 酚紅葡萄糖肉湯 250
Anti-Artemin Artemin抗體 用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗(yàn) 木糖-明膠培養(yǎng)基 250
Anti-ARAlpha1/ADRA1B alpha 1腎上腺素能受體抗體 用于臘樣芽胞桿菌選擇性分離培養(yǎng) Bacilus Cereus Selective Agar Base 臘樣芽胞桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ) 250
Anti-MASH1 神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體 用于食品中臘樣芽胞桿菌鑒定和計(jì)數(shù)(APHA方法) Dextrose Casein-peptone Agar 葡萄糖酪胨瓊脂 250
鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒Anti-ASIC1/BNaC2 酸敏感離子通道1抗體 加入250ml TSC瓊脂基礎(chǔ)中 D-環(huán)絲氨酸 0.1g/支*2
Anti-ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng) Sporulation Broth 產(chǎn)芽孢肉湯 250
Anti-ASPP2/p53BP2 P53凋亡刺激蛋白2抗體 用1ml無(wú)菌水溶解后添加于100ml HB0256中 Polymyxin B 多粘菌素B 1.2mg/支*5
Anti-AGT 血管緊張素原抗體 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Poly Peptone Yeast Extract Medium 多價(jià)蛋白胨-酵母膏 (PY) 培養(yǎng)基 250