巴氏*線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

巴氏*線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

實(shí)驗(yàn)步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】巴氏*線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱(chēng)】Nematodirus battus
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7002
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè)，所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀，可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線(xiàn)判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR（Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板，擴(kuò)增β-actin基因，與同類(lèi)產(chǎn)品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng)，擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
巴氏*線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟	溫度	時(shí)間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	94℃	5   min	1
變性	94℃	10   sec	30-40
退火	50-65℃	20   sec	30-40
延伸	72℃	30   sec/kb	30-40
終延伸	72℃	5   min	1

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
Osthole載脂蛋白A1檢測(cè)試劑盒20mg

異托銨（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 IPRATROPIUM BROMIDE 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum廣州蒼白桿菌 Escherichia coli

Osthole3-氨基-2,4,6-三碘苯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格：規(guī)格：人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)CLIA試劑盒 0.2ml

人OPNphosphoGluR1(Ser849)  化谷氨受體1抗體規(guī)格:96T/48TAmitraz規(guī)格:100mgD乳檢測(cè)試盒20mg人喉癌細(xì)胞,TU686細(xì)胞1x10^6cells

Protodioscin載脂蛋白A1檢測(cè)試劑盒20mg

遠(yuǎn)志山III 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 原癌基因cMAF抗體 APOL4 ELISA Kit 載脂蛋白L4(APOL4)ELISA試劑盒

Muscone

人骨保護(hù)素(OPG)ZNF471  鋅指蛋白471抗體規(guī)格:96T/48TAmitriptyline Hydrochloride規(guī)格:1．5gD乳鹽檢測(cè)試盒20mg人喉癌細(xì)胞，TU212細(xì)胞1x10^6cells

98%5g25ml琥珀脫酶(SDH)檢測(cè)試劑盒(INT比色法)platelet associated IgG

4-(反-4-基環(huán)己基)(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile 293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系

骨髓基質(zhì)細(xì)胞抗原2檢測(cè)試盒20mgCD45分子檢測(cè)試盒Clusterofdifferentiation4

98%25g100ml琥珀脫酶(SDH)檢測(cè)試劑盒(INT微板法)purified protein derivative  antibody

辛乙酯(Standard for GC,>99%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC) Ethyl octanoate

Cholic acidBR，98%靶向核糖核酶檢測(cè)試盒20mgCD4分子檢測(cè)試盒Clusterofdifferentiation8

98%5g25g乳脫酶(LDH)檢測(cè)試劑盒(二硝基肼比色法)Chlamydiapneumoniae IgA

 鈣非依賴(lài)性脂酶A2(iPLA2)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)

脫氧核糖核酶Ⅰ檢測(cè)試盒20mgCD8分子檢測(cè)試盒cJunNterminalkinases
巴氏*線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒N金雀花堿碘鹽 CAS號(hào)： 20013223 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

五水合司巴；五水合金雀花堿；五 CAS號(hào)： 1556278 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

3羥9,10二氧紫檀；美迪 CAS號(hào)： 73340417 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

寶藿苷II；大花羊藿苷A；意卡瑞苷A CAS號(hào)： 55395078 規(guī)格： HPLC≥98%;5mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

3O糖苷；莰菲3O CAS號(hào)： 17650849 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

木犀草素7O新橙皮糖苷 CAS號(hào)：  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

巨大戟3,4:5,20雙縮 CAS號(hào)： 77573445 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

巨大戟5,20縮3當(dāng)歸 CAS號(hào)： 87980685 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

巨大戟5,20縮 CAS號(hào)： 77573434 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

巨大戟3O當(dāng)歸 CAS號(hào)： 75567372 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

當(dāng)歸 CAS號(hào)： 94487748 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

當(dāng)歸 CAS號(hào)： 565639 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

皂皮 CAS號(hào)： 631016 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

美商陸 CAS號(hào)： 54928051 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

介芬 CAS號(hào)： 460590 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)