肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

參數規(guī)格：
產品名稱：肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma pneumoniae
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）。
產品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

?
實驗過程：
一、肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2．產品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
以下是公司正在熱銷的產品：
Colchicine載脂蛋白A5檢測試劑盒20mg

鐵冬青;Rutundic acid 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 三腺苷結合盒轉運蛋白4抗體 ICAM-3/CD50 ELISA Kit 細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒

結合珠蛋白(Hpt)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 FAM171B / KIAA1946 蛋白 (His 標簽)*10(g)

AlphaSCA(Human Alphasarcomeric actin) ELISA Kit  人α橫紋肌肌動蛋白CAS號：660 雪花蓮凝集素檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒30608629

Cytisine載脂蛋白B100檢測試劑盒20mg

鋁十六水(>98%,BR) 質量規(guī)格：>98%,BR Aluminum sulfate, hexadecahydrate ZR-75-30(人腺細胞)5×106cells/瓶×2

Apigenin氨苯標準品規(guī)格：規(guī)格：人腎上腺髓質素(ADM)Polyclonal Antibody 0.2ml

SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit  人平滑肌肌球蛋白CAS號：604 游離蛋白檢測試盒100uHuman/人Elisa試盒30608629

99%500g25g氨氨基轉移酶(ALT)檢測試劑盒(單試劑法)phospholipase A2

氧脲;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格： 0.1g 甘肽受體3抗體 CX31 ELISA Kit 間隙連接蛋白31(CX31)ELISA試劑盒

Protein and Peptide  蛋白質與多肽*血管緊張素Ⅱ受體1檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4867372

99%25g100g氨氨基轉移酶(ALT)檢測試劑盒(賴氏比色法)Calretinin B1

鵝去氧膽 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 酪氨蛋白激酶受體B6抗體 CFL2 ELISA Kit 絲切蛋白2(CFL2)ELISA試劑盒

BSA (bovine serum albumin)  牛血清白蛋白進口、分裝血管緊張素Ⅱ受體2檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒486748

98%100g5g氨氨基轉移酶(ALT)檢測試劑盒(賴氏比色法)indoleamine 2,3dioxygenase 1

D-δ-生育三酚  英文名稱：D- Delta - the birth of the three allyl phenol   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支 子宮珠蛋白抗體

KLH (keyhole limpet hemocyanin)  血藍蛋白進口、原裝天冬氨酶2檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒486748
肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒五氯;純品型;標準品;有證書 CAS號： 82688 規(guī)格： 0.25g 訂購|咨詢

;純品型;標準品;有證書 CAS號： 100516 規(guī)格： 100mg 訂購|咨詢

正十六;純品型;標準品;有證書 CAS號： 544763 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢

2氯;純品型;標準品 CAS號： 95498 規(guī)格： 0.5g 訂購|咨詢

查爾 CAS號： 94417 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

3吲哚 CAS號： 87514 規(guī)格： HPLC≥98%;250mg 訂購|咨詢

胞苷 CAS號： 65463 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

尿苷 CAS號： 58968 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

肌苷 CAS號： 58639 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

鳥苷 CAS號： 118003 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

N去荷葉堿 CAS號：  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

異櫻花亭苷 CAS號：  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

4beta羥膽固 CAS號： 17320104 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

7beta羥膽固 CAS號： 566278 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

27羥膽固 CAS號： 20380114 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢