組織微環(huán)境中有復雜的細胞組成，這些細胞的表型、狀態(tài)、豐度、分布都有著重要的生物學意義和臨床價值。借助抗體染色可以將其在組織原位上呈現(xiàn)出來。免疫組化染色是一種研究組織形態(tài)和原位蛋白表達的常見技術，常規(guī)IHC檢測只能展示單一指標，難以呈現(xiàn)復雜的組織微環(huán)境中的細胞組成、狀態(tài)和關系，而這些信息對疾病的診斷和治療至關重要！
酪氨信號放大技術原理：類似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法，TSA技術同樣采用HRP標記的二抗，HRP催化加入體系的熒光素底物，生產活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪氨酸共價結合，使樣品上穩(wěn)定的共價結合熒光素。之后用熱修復法洗去非共價結合的抗體，在換下一種一抗來第二輪孵育，換另一種熒光素底物，如此往復就可實現(xiàn)多重標記。

多重熒光免疫組化染色是基于抗原、抗體特異性結合的原理，選用辣根過氧化物酶（HRP）標記的二抗抗體，對試劑盒中的熒光染料進行活化，將信號共價結合到抗原上。借助于不同的熒光染料標記，通過多輪染色循環(huán)實現(xiàn)組織或細胞的原位多靶點染色。

TSA單色熒光染料520、TSA單色熒光染料570、TSA單色熒光染料650、信號放大反應液、抗兔HRP標記二抗、抗熒光淬滅封片劑、DAPI.

四色多重熒光免疫組化染色試劑盒主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色。

1. 熒光染料的稀釋：若染料為干粉，使用100ulDMSO溶解，制成100X染料母液；若染料為液態(tài)表示出廠即為DMSO溶解的100X母液；使用信號放大反應液按1:100稀釋制備染料工作液（現(xiàn)用現(xiàn)配）；DAPI使用無菌水按1:100稀釋制備工作液。
2. 二抗的使用：試劑盒為抗兔二抗，適用小鼠組織，實驗前請核實一抗種屬是否匹配。人源樣本請參考（#abs50012）。

四色多重熒光免疫組化染色試劑盒 熒光染料需避光保存，2～8℃儲存，收到貨起有效期為12個月。

1. 本試劑盒只用于免疫組化，不做其他用途。
2. 本試劑盒僅限于專業(yè)人員使用。
3. 應采用適當?shù)姆雷o措施，以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。
4. 超過有效期的試劑活性可能降低，因此不得使用超過有效期的試劑。
5. 若將本試劑盒的染色組分與其他公司的產品混合使用，在染色過程中可能出現(xiàn)異常情況。
6. 脫蠟不*，容易影響染色效果。
7. 為了防止可能出現(xiàn)的假陰性、假陽性結果，實驗過程中需有陽性對照及陰性對照同時進行。
8. 使用本試劑盒中所產生的各種廢棄物都應按照《醫(yī)療廢物管理條例》進行處理。

1.Dabbs David J. 診斷免疫組織化學(M). 北京：北京大學醫(yī)學出版社，2008.9.
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3.Stack, E. C., et al., Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods, 2014 70 (1): 46-58.
4.錢幫國. 焦磊. 多標記免疫熒光染色及多普成像技術在組織學研究中的應用. 中國組織化學與細胞化學雜志, 2017 (4): 373-382.