大鼠腎成纖維原代細胞

大鼠腎成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠腎成纖維細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損以及骨創(chuàng)傷的修復有著十分重要的作用。腎成纖維細胞是腎臟結締組織中重要的細胞類型，在體外培養(yǎng)中，一般大致成梭形、多角形或不規(guī)則形等，為貼壁生長型細胞。剛分離的腎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。其主要功能有：①組成過濾屏障內壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細胞和上皮細胞，進而影響腎臟病變。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠腎成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠腎成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

IL23R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液   超氧化物歧化酶分析試劑盒SOD  腸靜脈內皮細胞Many   中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1  HeLa   人細胞  raw264.7 兔原代脂肪干細胞 人原代星形膠質細胞

M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原)

CKB Protein Human 重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白

CXCL9重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Mouse 重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽) Protein

大鼠嗜鉻蛋白A(CHGA)試劑盒 ，英文名： CHGA ELISA Kit

Mouse vitamin D (VD) ELISA Kit 小鼠(VD)試劑盒

RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHDVIgM(HumanHepatitisDvirusIgM)ELISAKit人丁型肝IgM

細胞TEL激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitcath-K倉鼠組織蛋白酶K

血小板膜糖蛋白 (GP IIb/IIIa)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

生長相關因子 (GRO)    作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

生長相關因子 α(GRO α)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

過氧化物酶 (GSH-Px)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

大鼠腎成纖維原代細胞小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai hepatitis B virus e aibody (HBeAb) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒e抗體(HBeAb)試劑盒

HumanexteinELISAKit 人外顯肽(extein)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforABAb(Humanai-braiissueaibody)ELISAKit人抗腦組織抗體

(0.05%)乙四乙酸混合液100毫升

Mouseneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CDK1重組小鼠 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

歸巢關聯細胞黏附分子(HCAM)重組蛋白 Recombinant Homing Associated Cell Adhesion Molecule (HCAM)

GALNT2重組人 GALNT2 / GalNAc-T2 蛋白 Protein

DYRK3 Protein Human 重組人 DYRK3 / REDK 蛋白 (His & GST 標簽)

CD40 Protein Canine 重組狗 CD40 / TNFRSF5 蛋白