大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的細(xì)胞) HEL 人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 1ml/T75 HSC 人胃癌細(xì)胞 A-431 人表皮癌細(xì)胞 小鼠原代三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在銀浸染標(biāo)本中，少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞。但是用特異性免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示的少突膠質(zhì)細(xì)胞，其突起并不少，而且還有許多分支。少突膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu)、協(xié)助生物電信號(hào)的跳躍式高效傳遞并維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能。其異常不僅會(huì)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變，還會(huì)引起神經(jīng)元損傷或精神類疾病，甚至可以引發(fā)腦腫瘤。根據(jù)少突膠質(zhì)細(xì)胞的分布和位置可分為三種：①束間少突膠質(zhì)細(xì)胞（interfasicular-oligodendrocyte），分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間；②神經(jīng)細(xì)胞周少突膠質(zhì)細(xì)胞（perineuronal-oligodendrocyte），分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū)，常位于神經(jīng)細(xì)胞周圍，與神經(jīng)細(xì)胞的關(guān)系密切，故又稱為神經(jīng)細(xì)胞周衛(wèi)星細(xì)胞（perineuronal-satellite-cell），但在神經(jīng)細(xì)胞胞體與此類細(xì)胞之間亦常有星形膠質(zhì)細(xì)胞的薄片狀突起分隔；③血管周少突膠質(zhì)細(xì)胞（pcrivascular-oligodendrocyte），主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周圍。少突膠質(zhì)細(xì)胞形成的髓鞘膜是最為特化和復(fù)雜動(dòng)物細(xì)胞膜之一，其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。如半乳糖腦苷脂（GC），它是髓鞘的一種主要類脂，用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來，神經(jīng)發(fā)育學(xué)科進(jìn)展較快，更多的少突膠質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)記物被鑒定出來，如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞采用蛋白酶消化、混合細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)  人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a  5E Others Mouse 小鼠 5E / CD73 人細(xì)胞裂解液   GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B 人細(xì)胞裂解液   IGFBP5 羊原代乳腺上皮細(xì)胞 小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mgMTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC 致癌基因(抗原)

AHSP Protein Human 重組人 AHSP / ERAF 蛋白

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SIRT1重組人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA 試劑盒

Rat ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒

HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-Ab試劑盒人抗BP180抗體(BP180-Ab)試劑盒

植物核糖體分離試劑盒10次

Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒

質(zhì)粒大量提取試劑盒   5T

PlasmidMaxiKit   10T

質(zhì)粒中量提取試劑盒   50T

PlasmidMidiKit   100T

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒

Human ai polymyositis scleroderma aibody (PM-Scl/PM-1) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)試劑盒

Porcinemaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAGEs(Mouseadvancedglycationendproducts)ELISAKit小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物

血液砷元素比色法定量試劑盒20次

Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISAKit小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)試劑盒

AIMP1重組小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 Protein

凋亡相關(guān)因子(FAS)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis (FAS)

KCNIP3重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 Protein

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白

LTBR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。