詳細(xì)介紹
一、大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒
1.1 用途
該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中
CRP濃度。
1.2 原理
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
二、大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒組成
2.1 產(chǎn)品保存
▲未開封試劑盒,4℃保存;已開封,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存,其他4℃保存。
2.2 產(chǎn)品組成表
三、常見問題
3.1 影響ELISA試劑盒曲線的因素
標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。我公司技術(shù)人員在處理售后的問題中,有不少科研朋友咨詢曲線的問題。
下面小編將影響ELISA試劑盒曲線問題的原因做了總結(jié):
一 OD值不正常的可能原因是:
1、試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃;
2、溫度控制不好,控制正確溫度;
3、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確,控制孵育時(shí)間;
4、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干;
5、陽光直射,對著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避光;
6、酶標(biāo)儀的波長錯(cuò)誤,酶標(biāo)儀的波長450nm;
7、抗體的稀釋錯(cuò)誤,正確的稀釋抗體;
8、水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替。
二 白板的可能原因是:
1、洗滌液配制錯(cuò)誤,正確的配制洗滌液;
2、少加液體(錯(cuò)加液體),正確的步驟加液體。
三 無梯度可能原因是:
1、標(biāo)準(zhǔn)品也污染,換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板;
2、OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次;
3、人為點(diǎn)板,不要點(diǎn)板。
四 線性不好可能原因是:
OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次。
?四、溫馨提示
試劑盒使用完畢后,請妥善處理相關(guān)耗材,避免環(huán)境污染!