血液溶漿機(jī)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為紅細(xì)胞研究   干細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展使得在體外定向誘導(dǎo)干細(xì)胞分化獲得和正常紅細(xì)胞*一樣的紅細(xì)胞替代產(chǎn)品成為可能, 而且紅細(xì)胞產(chǎn)品與其他干細(xì)胞產(chǎn)品相比具有明顯的優(yōu)勢, 如發(fā)揮功能不需要三維組織結(jié)構(gòu)、應(yīng)用僅需考慮 ABO 血型、無細(xì)胞核使得其安全風(fēng)險明顯降低等, 這些優(yōu)勢使得干細(xì)胞在紅細(xì)胞的規(guī)模化制備與應(yīng)用成為干細(xì)胞研究、 血液溶漿機(jī)應(yīng)用及產(chǎn)業(yè)化的zuijia選擇. 人胚胎干細(xì)胞(hES 細(xì)胞)和誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS 細(xì)胞)具有分化成機(jī)體所有類型組織細(xì)胞的潛能, 體外誘導(dǎo)具有通用血型和稀有血型hES/iPS細(xì)胞定向分化, 獲得充足數(shù)量的紅細(xì)胞、血小板等血細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品, 用于臨床造血支持治療和輸血治療, 將成為未來血細(xì)胞治療的一個革命性變化, 有望zui終實(shí)現(xiàn)充足、安全的全新輸血治療模式. 近年來, 野戰(zhàn)輸血研究所對 hES 細(xì)胞分化為造血細(xì)胞的體系進(jìn)行了系統(tǒng)研究, 對誘導(dǎo)分化體系進(jìn)行了優(yōu)化, 表明前列腺素 E2 能夠促進(jìn) hES 細(xì)胞體外向造血細(xì)胞分化, 并對其作用機(jī)制進(jìn)行了初步的探討, 同時還開展了體外誘導(dǎo) hES 細(xì)胞分化為紅
6    系細(xì)胞的相關(guān)研究, 建立了利用胎肝提取物誘導(dǎo) hES 細(xì)胞分化為紅系細(xì)胞的培養(yǎng)體系, 并對誘導(dǎo)分化獲得的紅系細(xì)胞的功能進(jìn)行了初步的鑒定, 這些研究結(jié)果的取得為zui終利用干細(xì)胞體外分化制備紅細(xì)胞產(chǎn)品應(yīng)用于臨床治療奠定了基礎(chǔ).    4  臨床輸血安全研究    血液溶漿機(jī)臨床輸血是血液安全工作的終點(diǎn)站, 直接關(guān)乎患者的療效和生命安危, 其研究的重點(diǎn)是輸血治療效果和如何避免輸血不良反應(yīng)的發(fā)生.   4.1  血小板輸注無效的機(jī)制研究   血小板輸注無效歸因于免疫和非免疫兩大類. 對 30 例惡性血液病患者血小板的輸注效果進(jìn)行回顧性分析, 發(fā)現(xiàn)半數(shù)是因?yàn)楦腥緦?dǎo)致血小板輸注無效, 免疫因素只占 15%. 在此基礎(chǔ)上, 我們研究了去白、輻照手工分離混合血小板的制備工藝和臨床輸注效果研究, 發(fā)現(xiàn)該血小板制劑可有效預(yù)防血小板輸注無效, 去白后 5 人份血小板中的淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng) 5 d 后, 培養(yǎng)液中未檢測到 IL-2 和 IL-4, 單向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)淋巴細(xì)胞增殖率 5 人份同單人份血小板, 去白前明顯高于去白后; 去白混合輻照手工血小板臨床輸注效果與去白混合輻照機(jī)采血小板的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(a2=0.833, P>0.05), 可以應(yīng)用于臨床.   4.2   血液溶漿機(jī)輸血相關(guān)免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究   同種異基因的血液輸注會導(dǎo)致受血者免疫狀態(tài)發(fā)生改變, 這種改變被稱為輸血相關(guān)性免疫調(diào)節(jié)(transfusion related immunomodulation, TRIM). 軍事醫(yī)學(xué)*開展了供血者KIR與受血者HLAI類分子不同程度匹配情況下的異源反應(yīng)性 NK 細(xì)胞對輸血相關(guān)免疫抑制的作用研究. 模擬臨床輸血狀態(tài), 采用miniMACS 免疫磁珠分選方法, 從外周血單個核細(xì)胞(PBMC)中得到純化的 NK 細(xì)胞, 體外培養(yǎng)并采用PCR-SSP 法進(jìn)行 5 種 KIR 抑制基因的分型. 將已經(jīng)KIR 分型的 NK 細(xì)胞與已知 HLA 分型的血液病患者骨髓移植供者的全血(20 mL)按比例(相當(dāng)于 60 kg 體重個體輸入 800 mL 全血)混合, 不同時間點(diǎn)取樣檢測免疫指標(biāo)的變化. 根據(jù) KIR 和 HLA 的不相合程度分為 20 組, 比較不同相合程度對血液免疫功能的影響.   結(jié)果表明, 隨 KIR 與 HLA 不相合程度的加大, TNF-a, TNF-a, IFN-a, GM-CSF 的濃度逐漸增加, (P<0.05), 說明 KIR 與 HLA 不相合程度越高越能激發(fā)異源反應(yīng)性 NK 細(xì)胞的免疫功能, 可更好地逆轉(zhuǎn)輸血相關(guān)免疫抑制作用.   5  結(jié)語   輸血相關(guān)的理論、技術(shù)、產(chǎn)品、裝置與標(biāo)準(zhǔn)研究是輸血醫(yī)學(xué)的核心內(nèi)容, 為形成整體、靈活、、、 的安全血液供應(yīng)鏈提供全面的科技支撐是輸血醫(yī)學(xué)的主要任務(wù). 輸血醫(yī)學(xué)的創(chuàng)新發(fā)展, 依賴于相關(guān)技術(shù)的突破, 依賴于血液供應(yīng)鏈對輸血醫(yī)學(xué)技術(shù)、產(chǎn)品、裝置與標(biāo)準(zhǔn)的綜合集成.