發(fā)酵設(shè)備滅菌安全操作步驟

濕熱滅菌法

• 準(zhǔn)備工作：

• 設(shè)備檢查：檢查發(fā)酵設(shè)備的完整性，包括罐體、管道、閥門(mén)、攪拌器、溫度傳感器、pH 電極、溶氧電極等部件是否正常，有無(wú)損壞或泄漏。同時(shí)確保所有的接口、連接部位都已密封好146.

• 清潔消毒：先將發(fā)酵罐內(nèi)的殘留物清除干凈，可以使用冷水、熱水、堿性清潔劑等進(jìn)行清洗，然后用清水沖洗，去除清洗劑和殘留物3.

• 電極處理：取下溫度傳感器、pH 電極、溶氧電極等敏感部件，溫度傳感器一般不需要滅菌；pH 電極滅菌前要標(biāo)定，取下 pH 電纜線，蓋上紅色保護(hù)帽，將 pH 電極插到底并擰緊；溶氧電極用飽和的亞硫酸鈉溶液標(biāo)定 0 點(diǎn)，取下 DO 電纜線，DO 電纜接口處用錫箔紙包好，注意檢查溶氧電極里頭的保護(hù)液是否充足，不足則需添加148.

• 管道拆卸：拆下發(fā)酵罐上和冷凝器上的進(jìn)、出水管，拆下的同時(shí)要用夾子夾住拆下水管的接頭處，防止水流出；發(fā)酵罐上的過(guò)濾器兩端要用夾子夾死，過(guò)濾器的出口處用錫箔包好148.

• 物料移除：將發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基、發(fā)酵液等物料全部排出，并妥善處理，防止污染環(huán)境。

• 滅菌操作：

• 裝鍋：將預(yù)處理好的發(fā)酵設(shè)備放入滅菌鍋中，注意不要使設(shè)備與滅菌鍋內(nèi)壁接觸，避免局部過(guò)熱。對(duì)于大型發(fā)酵罐，可能需要分段滅菌，將各部件分別放入滅菌鍋的不同位置148.

• 通入蒸汽：打開(kāi)蒸汽發(fā)生器入口閥門(mén)，啟動(dòng)蒸汽發(fā)生器，先將蒸汽發(fā)生器內(nèi)的鐵銹等雜質(zhì)排出，然后關(guān)閉排水閥。慢慢打開(kāi)蒸汽發(fā)生器主閥和夾套入口閥，向夾套內(nèi)通入蒸汽，開(kāi)始時(shí)蒸汽壓力不穩(wěn)定，壓力表指針可能劇烈抖動(dòng)，可適當(dāng)關(guān)閉夾套入口閥，待壓力穩(wěn)定后再全開(kāi)夾套出口閥，使蒸汽在夾套內(nèi)循環(huán)，對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行預(yù)熱6.

• 升溫升壓：繼續(xù)通入蒸汽，使滅菌鍋內(nèi)的溫度和壓力逐漸升高，一般要求溫度達(dá)到 121℃，壓力達(dá)到 0.105MPa 左右。升溫過(guò)程中要注意觀察溫度和壓力的變化，防止超溫超壓28.

• 保持時(shí)間：在達(dá)到設(shè)定的溫度和壓力后，保持 20-30 分鐘，以確保滅菌。保持時(shí)間應(yīng)根據(jù)發(fā)酵設(shè)備的大小、裝載量、培養(yǎng)基成分等因素適當(dāng)調(diào)整28.

• 冷卻與后處理：

• 冷卻降壓：滅菌完成后，先關(guān)閉蒸汽發(fā)生器主閥，停止通入蒸汽，然后緩慢打開(kāi)滅菌鍋的排氣閥，逐漸排出蒸汽，使滅菌鍋內(nèi)的壓力和溫度降低。降壓過(guò)程要緩慢進(jìn)行，防止因壓力驟降導(dǎo)致發(fā)酵設(shè)備損壞或培養(yǎng)基沸騰溢出。

• 取出設(shè)備：當(dāng)滅菌鍋內(nèi)的壓力降至常壓，溫度降至 60℃以下時(shí)，方可打開(kāi)滅菌鍋取出發(fā)酵設(shè)備。取出時(shí)要佩戴防護(hù)手套，防止?fàn)C傷148.

• 部件安裝與調(diào)試：將拆卸下來(lái)的部件如溫度傳感器、pH 電極、溶氧電極、進(jìn)水管、出水管等按照正確的方法安裝回發(fā)酵罐上，并檢查各部件是否安裝牢固，連接是否緊密。對(duì)溶氧電極進(jìn)行標(biāo)定，檢查空壓機(jī)的輸出壓力等參數(shù)是否正常148.

干熱滅菌法

• 準(zhǔn)備工作：

• 設(shè)備清洗與干燥：與濕熱滅菌法的清潔消毒步驟類似，先將發(fā)酵設(shè)備清洗干凈，去除內(nèi)部的污垢和殘留物，然后將設(shè)備晾干或用烘箱烘干，確保設(shè)備內(nèi)無(wú)水分殘留。

• 物品準(zhǔn)備：將需要滅菌的發(fā)酵設(shè)備及部件放入干熱滅菌箱中，注意物品之間要留有一定的空隙，以便熱空氣流通，保證滅菌效果。

• 滅菌操作：

• 設(shè)定參數(shù)：關(guān)閉干熱滅菌箱門(mén)，打開(kāi)電源，設(shè)定滅菌溫度和時(shí)間。一般干熱滅菌的溫度為 160-180℃，保持 2-4 小時(shí)2.

• 開(kāi)始滅菌：?jiǎn)?dòng)干熱滅菌箱，開(kāi)始加熱升溫，在滅菌過(guò)程中要密切觀察溫度的變化，確保溫度穩(wěn)定在設(shè)定范圍內(nèi)。由于干熱滅菌的溫度較高，時(shí)間較長(zhǎng)，操作人員要注意防止?fàn)C傷，并避免在滅菌過(guò)程中打開(kāi)滅菌箱門(mén)，以免影響滅菌效果。

• 冷卻與后處理：

• 冷卻：滅菌完成后，關(guān)閉干熱滅菌箱電源，讓設(shè)備在滅菌箱內(nèi)自然冷卻至室溫。切勿在高溫下取出設(shè)備，以免造成人員燙傷和設(shè)備損壞。

• 取出設(shè)備：待設(shè)備冷卻后，方可打開(kāi)滅菌箱門(mén)取出發(fā)酵設(shè)備。取出時(shí)要小心操作，防止碰壞已滅菌的設(shè)備和部件。使用前檢查設(shè)備的完整性和性能是否正常。

化學(xué)滅菌法

• 準(zhǔn)備工作：

• 設(shè)備清潔：先對(duì)發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行清洗，去除表面的污垢和雜質(zhì)，確保設(shè)備表面干凈光滑，以便化學(xué)藥劑能夠充分接觸和發(fā)揮作用。

• 選擇藥劑：根據(jù)發(fā)酵設(shè)備的材質(zhì)、污染程度以及滅菌要求，選擇合適的化學(xué)滅菌劑，如甲醛、過(guò)氧乙酸等，并按照規(guī)定的濃度和用量進(jìn)行配制2.

• 個(gè)人防護(hù)：操作人員要佩戴好防護(hù)手套、口罩、護(hù)目鏡等個(gè)人防護(hù)用品，防止化學(xué)藥劑對(duì)人體造成傷害。

• 滅菌操作：

• 密封設(shè)備：將發(fā)酵設(shè)備及相關(guān)管道密封好，確?；瘜W(xué)滅菌劑能夠在密閉的環(huán)境中充分發(fā)揮作用，提高滅菌效果。

• 導(dǎo)入藥劑：按照一定的方法將配制好的化學(xué)滅菌劑導(dǎo)入發(fā)酵設(shè)備內(nèi)。例如，對(duì)于甲醛熏蒸法，可以在容器中加熱甲醛溶液使其揮發(fā)，或者使用甲醛發(fā)生器將甲醛氣體導(dǎo)入設(shè)備及管路內(nèi)；對(duì)于過(guò)氧乙酸熏蒸法，可以將過(guò)氧乙酸加熱蒸發(fā)或使用噴霧器將過(guò)氧乙酸溶液霧化后導(dǎo)入設(shè)備及管路內(nèi)2.

• 保持時(shí)間：保持一定的溫度和濕度，讓化學(xué)滅菌劑在設(shè)備內(nèi)作用一定時(shí)間。一般甲醛熏蒸需要保持 8-12 小時(shí)，過(guò)氧乙酸熏蒸需要保持 2-4 小時(shí)2.

• 后處理：

• 通風(fēng)換氣：滅菌完成后，要對(duì)發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行充分的通風(fēng)換氣，以去除殘留的化學(xué)滅菌劑。通風(fēng)時(shí)間要足夠長(zhǎng)，確保設(shè)備內(nèi)的化學(xué)藥劑濃度降至安全范圍以下，避免對(duì)后續(xù)的發(fā)酵過(guò)程和操作人員造成危害2.

• 清洗設(shè)備：通風(fēng)換氣后，用清水對(duì)發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行清洗，去除殘留的化學(xué)藥劑和可能產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)物，然后再用無(wú)菌水沖洗一遍，確保設(shè)備內(nèi)部干凈無(wú)菌。

本廠閑置二手自吸式發(fā)酵罐