目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞 非電擊>> TG1Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞
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更新時(shí)間:2024-03-20 15:53:50瀏覽次數(shù):277評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50支100ul |
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貨號(hào) | ABG015-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
主要用途 | 細(xì)胞培養(yǎng) |
TG1 Chemically Competent Cell
基因型:
F′ traD36 proAB lacIqZΔM15]supE thi-1Δ(lacproAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)
簡(jiǎn)要說明:
TG1來源于E. coli K-12菌株,是目前生長(zhǎng)速度最快的克隆用大腸桿菌菌株,在平板上37℃,7h可見克隆。主要的噬菌體展示用菌株,同時(shí)也可用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn);但不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)推薦使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內(nèi)大量的核酸酶。High5TM系列TG1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。
操作說明:
1.TG1感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化,融化后8分鐘內(nèi)加入質(zhì)粒,否則會(huì)影響轉(zhuǎn)化效率。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
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