CHO宿主細(xì)胞殘留蛋白HCP

宿主細(xì)胞殘留蛋白HCP詳細(xì)介紹：

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞宿主蛋白酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒是用來(lái)定量分析以中國(guó)倉(cāng)鼠卵 巢細(xì)胞（Chinese Hamster Ovary cells，CHO）為表達(dá)細(xì)胞的生物藥物中宿主蛋白 雜質(zhì)的試劑盒。首先，用不同濃度的CHO標(biāo)準(zhǔn)蛋白制作一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，然后再根 據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)來(lái)分析生物藥物中宿主細(xì)胞殘留蛋白的含量。具體方法為：先將CHO 標(biāo)準(zhǔn)蛋白或者待測(cè)樣品適當(dāng)稀釋后加入已包被好抗CHO宿主蛋白抗體的96孔平 板中。經(jīng)過(guò)1.5小時(shí)的保溫，宿主細(xì)胞蛋白與已經(jīng)固定在平板上的抗體結(jié)合形成 抗原－抗體復(fù)合物。此復(fù)合物被隨后加入的生物素標(biāo)記的抗CHO宿主蛋白的抗體 結(jié)合并進(jìn)一步形成更高級(jí)的復(fù)合物，反應(yīng)45分鐘后洗去未結(jié)合的物質(zhì)。再加入鏈 霉親合素-辣根過(guò)氧化物酶復(fù)合物，靜置30分鐘。因鏈霉親合素可以與任何帶生 物素標(biāo)記的抗體相結(jié)合，從而使鏈霉親合素-辣根過(guò)氧化物酶復(fù)合物連接到平板 上。接下來(lái)沖洗掉未結(jié)合的物質(zhì)，加入TMB底物。固相上的酶催化底物產(chǎn)生顏色 反應(yīng)，待顏色反應(yīng)一段時(shí)間后，終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定其結(jié)果， 此結(jié)果能間接地反應(yīng)結(jié)合到平板上的的宿主細(xì)胞蛋白數(shù)量的多少。根據(jù)CHO宿主 蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲定量分析生物藥物中宿主細(xì)胞殘留蛋白的含量。