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透射電鏡制備注意事項(xiàng)(細(xì)胞)
1、細(xì)胞數(shù)量: > 1*10的6次方;
2、消化細(xì)胞時(shí)要注意不要過(guò)度,及時(shí)用含血清的培養(yǎng)液終止消化;
3、終止消化后,預(yù)冷的PBS (pH 7.4 )洗細(xì)胞1-2次離心(1500rpm, 5min)棄上清(細(xì)胞收集在1.5ml的EP管中) ;
4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制該溶液),可用吸管輕輕吹散細(xì)胞,使細(xì)胞懸浮于固定液中;
5、4度固定過(guò)夜后寄出 (寄送時(shí)加冰袋,并用2.5%戊二醛溶液將EP管中剩余空間充滿)。
腎臟組織樣本制備步驟:
1、迅速取材;2、PBS漂洗2次,切成小塊(米粒大?。?、快速放入2.5%戊二醛固定液中,4度固定過(guò)夜;4、固定液將整個(gè)容器里面的空間都充滿,封口膜封口;5、多加冰袋運(yùn)輸。
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