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Seahorse數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析-OCR、ECAR基本原理介紹

時間:2023-11-10閱讀:848
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Seahrose是以創(chuàng)96孔微孔盤為平臺,即時同步偵測有氧呼吸以及糖肆解作用的細胞代謝呼吸動態(tài)分析儀,通過該儀器的協(xié)助,研究者以更快的速度、更簡易的設(shè)計了解細胞以及線粒體如何運用不同的受質(zhì)作為能量的來源、評估疾病與有氧代J及線粒體運作狀態(tài)之交作用、分析代調(diào)節(jié)藥物對于生理的效應(yīng)、建立細胞品質(zhì)營理系統(tǒng)、快速篩選出具開發(fā)潛力之藥物及藥物毒性評估,可快速篩選出高質(zhì)量的細胞用于科研等多種不同應(yīng)用。

基本原理

Seahorse能量代謝分析儀是一種用于測量細胞能量代謝的儀器,可以通過測量細胞的耗氧率(OCR)和胞外酸化率(ECAR)來評估細胞的線粒體功能、糖酵解和氧化磷酸化等過程。OCR和ECAR的測量原理如下(圖1.1):

OCR(Oxygen Consumption Rate):OCR是指細胞對氧氣的消耗速率。Seahorse能量代謝分析儀通過測量細胞周圍培養(yǎng)基中的溶解氧含量的變化來確定OCR。在測量過程中,細胞被置于特定的耗氧試劑中,如噻唑類化合物(例如,琥珀酸、馬拉酸)。這些試劑會與細胞內(nèi)的線粒體呼吸鏈相互作用,導致氧氣消耗速率的變化。Seahorse能量代謝分析儀通過測量耗氧試劑與細胞周圍培養(yǎng)基中溶解氧含量的變化,計算細胞的OCR。

ECAR(Extracellular Acidification Rate):ECAR是指細胞外酸化速率,也可以理解為細胞產(chǎn)生的酸性代謝產(chǎn)物的釋放速率。Seahorse能量代謝分析儀通過測量培養(yǎng)基中pH值的變化來確定ECAR。在測量過程中,細胞被置于特定的酸化試劑中,如葡萄糖和丙酮酸鹽。這些試劑會導致細胞糖酵解過程中乳酸的產(chǎn)生,從而引起培養(yǎng)基pH值的變化。Seahorse能量代謝分析儀通過測量培養(yǎng)基中pH值的變化,計算細胞的ECAR。


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