ColProof^®質粒小量提取試劑盒

Col-P0101

試劑盒應用

本試劑盒采用硅膠膜吸附技術，高效專一地結合質粒DNA，操作簡單、快速。一次可處理1-4mL過夜培養(yǎng)的細菌培養(yǎng)液，最多可提取20µg質粒DNA。使用本試劑盒提取的質粒DNA超螺旋含量高，適合酶切、PCR、測序、連接轉化、文庫篩選、體外轉錄、轉染等實驗。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

試劑盒組成

備注：

1、第一次使用前，在洗滌液PW中加入48mL無水乙醇，并標記“√"和時間，避免重復加入。

2、若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前可在37℃水浴中預熱10分鐘溶解沉淀。

3、獨立包裝的RNaseA溶液可在室溫保存12個月，使用前全部加入溶液P1中，混合均勻2-8℃保存6個月。

保存條件

室溫保存一年。

自備材料

無水乙醇

使用方法

1、取1-4mL過夜培養(yǎng)的細菌，加入離心管中，12,000rpm離心1分鐘收集細菌。盡可能去除上清。

2、加入150μL溶液P1（使用前檢查是否已加入RNaseA溶液）至沉淀的離心管中，使用移液器輕輕吹打或渦旋振蕩器懸浮菌體。

3、向離心管中加入150μL溶液P2，溫和上下翻轉6-8次使菌體充分裂解。此時溶液變澄清。

注意：溫和混合，避免劇烈震蕩。

4、沿管壁向離心管中加入350μL溶液P3，快速上下翻轉6-8次，充分混勻，此時溶液出現(xiàn)絮狀沉淀。

5、12,000rpm離心5-10分鐘。

6、轉移550-600μL上清液至吸附柱P中（提前將吸附柱P置于收集管中），盡可能不要吸取到沉淀。

7、12,000rpm離心30秒。倒收集管中廢液，將吸附柱P放入收集管中。

8、加入500μL洗滌液PW（使用前檢查是否已加入無水乙醇），12,000rpm離心30秒。倒收集管中廢液，將吸附柱P放入收集管中。

9、重復步驟8一次。

10、12,000rpm離心1分鐘將洗滌液PW去除。

注意：盡可能將無水乙醇揮發(fā)wan全。

11、將吸附柱P置于干凈的離心管中，向吸附柱中間滴加50-100μL洗脫液PW。

注意：洗脫液PW體積不低于50μL，以免影響回收效率。為了提高洗脫效率，可將洗脫液PW提前置于65℃水浴中再使用。

12、12,000rpm離心1分鐘得到質粒DNA溶液。-20℃保存。