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HSF95 Insect Cell Medium 昆蟲培養(yǎng)基 CW003(2025 版)產(chǎn)品介紹
一、產(chǎn)品概述
CW003 昆蟲培養(yǎng)基專為 sf9、High Five 等昆蟲細胞的懸浮培養(yǎng)和瞬時表達設計,內含細胞生長所需的全部營養(yǎng)成分,無需額外添加其他物質即可直接使用,極大簡化了實驗操作流程。
二、核心優(yōu)勢
無血清配方:有效避免血清批次差異、外源因子污染等問題,為細胞培養(yǎng)提供更穩(wěn)定的環(huán)境。
2. 即用型設計:開箱即可使用,無需進行復雜的成分添加和調配,節(jié)省實驗準備時間。
3. 高效培養(yǎng):支持 sf9、High Five 等昆蟲細胞的懸浮培養(yǎng)馴化與高密度培養(yǎng),顯著提升細胞培養(yǎng)效率。
4. 基因表達支持:與桿狀病毒載體表達系統(tǒng)高度適配,可高效生產(chǎn)重組基因蛋白,為科研與生產(chǎn)提供可靠保障。
三、基礎參數(shù)
(此處待補充具體基礎參數(shù)內容)
四、使用方法
(一)細胞馴化與傳代
培養(yǎng)條件:溫度設定為 27℃,搖床轉速保持在 110 - 130 rpm;傳代時,細胞密度需控制在 0.8 - 1.2×10? cells/mL,以維持細胞的良好生長狀態(tài)。
2. 直接馴化:在多數(shù)情況下,使用其他培養(yǎng)基培養(yǎng)的 sf9、High Five 細胞,可直接通過日常傳代稀釋的方式更換至 CW003 培養(yǎng)基,細胞能夠自然適應新的培養(yǎng)環(huán)境。
3. 漸進式馴化
操作要點:選擇低代次且處于對數(shù)生長期的細胞進行馴化。
具體步驟:首先在原培養(yǎng)基中復蘇細胞,并使用原培養(yǎng)基連續(xù)傳代 2 - 3 次,直至細胞生長穩(wěn)定。隨后,采用原培養(yǎng)基與 CW003 培養(yǎng)基混合的方式逐步馴化(CW003 比例從 25% 逐步遞增至 90%),傳代細胞密度控制在 0.8 - 1.1×10? cells/mL,每 48 小時傳代一次。當細胞在含 90% 以上 CW003 培養(yǎng)基中生長狀態(tài)良好后,可嘗試將細胞傳代至 100% CW003 培養(yǎng)基,并連續(xù)傳代 3 - 4 次。若細胞仍能保持穩(wěn)定生長,即表明細胞已成功適應 CW003 培養(yǎng)基。
(二)細胞復蘇
從凍存設備中迅速取出細胞,在 37℃水浴環(huán)境下快速解凍,解凍過程中可輕輕晃動凍存管,確保解凍均勻,整個過程需控制在 120 秒以內,當凍存管內僅剩余小塊冰晶時停止。
2. 在生物安全柜內,將融化后的細胞全部轉移至無菌離心管中,加入 10 mL 預熱至 37℃的培養(yǎng)基,以 175 g 的離心力離心 5 分鐘,棄去上清液,再加入 20 - 30mL 預熱至 37℃的新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,最后轉移至搖瓶中進行培養(yǎng)。
(三)細胞凍存
凍存細胞應選擇處于對數(shù)生長期、狀態(tài)良好且活力≥98% 的細胞,以保證凍存后細胞的復蘇成功率。
2. 提前計算所需凍存的細胞管數(shù)和培養(yǎng)基體積,凍存密度推薦為 2.5 - 3.5×10? cells/ml/ 支(常規(guī)凍存濃度為 1.0 - 2.0×10? cells/ml/ 支)。
3. 凍存液配制:將 45% 新鮮培養(yǎng)基、45% 原培養(yǎng)基(上清)和 10% DMSO 充分混合均勻,配制好的凍存液存放于 4℃環(huán)境,建議當天配制當天使用。
4. 以 175 g 離心力離心 5 分鐘收集細胞,棄去上清液,使用 4℃預冷的凍存培養(yǎng)基重懸細胞。
5. 將重懸后的細胞液迅速分裝至無菌凍存管中,每管 1ml,并做好清晰的標簽標記。
6. 將細胞凍存管放入填充有異丙醇并經(jīng) 4℃預冷的程序降溫凍存盒中,置于 - 80℃冰箱(降溫速率為每分鐘下降 1℃)過夜,次日將細胞轉入液氮罐中長期保存。
上述潤色使產(chǎn)品介紹更專業(yè)規(guī)范。若你覺得某些部分還需調整,或想補充更多信息,歡迎隨時告訴我。
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