RBC裂解液

RBC裂解液，RBC-1601/RBC-1602 , 適用于裂解紅細(xì)胞，而不損傷其它有核細(xì)胞【產(chǎn)品簡介】：

ZDGSY生產(chǎn)的紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer)，是一種用于從人或動物的血液或組織樣品中裂解或去除紅細(xì)胞的溶液。本裂解液經(jīng)過優(yōu)化調(diào)整，只裂解紅細(xì)胞而幾乎不損傷其它有核細(xì)胞。 本產(chǎn)品包裝前已經(jīng)過無菌處理，如紅細(xì)胞裂解液處理后的樣品要做細(xì)胞培養(yǎng)或細(xì)胞融合，請在超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行整個裂解操作過程。

【保存條件】： 4°C保存，一年有效。室溫保存， 3個月有效。

【組織細(xì)胞樣品操作】：

1. 新鮮組織經(jīng)過膠原酶或胰酶等消化處理后，通過適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液，離心棄上清。
2. 加入3-5倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，混勻，裂解1-2分鐘（本步驟可在室溫或4°C度操作）。
3. 10000rpm離心5分鐘，棄紅色上清。（4°C離心效果更佳）。
4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟2-3一次，通常微量紅細(xì)胞不會影響后續(xù)檢測。
5. 加入適量PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞（400-500g離心2-3分鐘，棄上清）。
6. 可重復(fù)第5步1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍，4°C離心效果更佳。
7. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，用適量溶液重懸細(xì)胞后即可進(jìn)行計數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如組織細(xì)胞不需要培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)，則洗滌步驟（4-6）可省去。

【血液樣品】：

1. 取新鮮抗凝血，加入3-5倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液，混勻，裂解1-2分鐘（本步驟可在室溫或4度操作，對于鼠的血液，裂解1-2分鐘已經(jīng)足夠，對于人或牛大型動物的外周血，裂解時間需延長至6-10分鐘，并且裂解過程中要偶爾搖動試管以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解（裂解通常不超過15分鐘）。
2. 10000rpm離心5分鐘，棄上清(如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟1-3次。如所得BBC是用于核酸提取，則不需重復(fù)裂解過程，少量RBC的存在，并不影響下游實(shí)驗(yàn)，且下列步驟可省去，棄上清后直接加入白血病裂解液即可按照核酸提取步驟操作)。
3. 加入5倍細(xì)胞體積的PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸有核細(xì)胞，10000rpm離心2-3分鐘，棄上清。
4. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
5. 如所得白血病只是為提取DNA，則可在室溫下操作；若白血病為提取RNA，在4°C操作效果更佳。